Tīra Saposhnikovia divaricata eļļa sveču un ziepju izgatavošanai vairumtirdzniecības difuzora ēteriskā eļļa jaunums niedru degļu difuzoriem

Tīra Saposhnikovia divaricata eļļa sveču un ziepju izgatavošanai vairumtirdzniecības difuzora ēteriskā eļļa jauna niedru degļu difuzoriem Piedāvātais attēls

īss apraksts:

2.1. SDE sagatavošana

SD sakneņi tika iegādāti kā kaltēts garšaugs no Hanherb Co. (Guri, Koreja). Augu materiālus taksonomiski apstiprināja Dr. Go-Ya Choi no Korejas Austrumu medicīnas institūta (KIOM). Kupona paraugs (numurs 2014 SDE-6) tika deponēts Korejas standarta augu resursu herbārijā. Žāvēti SD sakneņi (320 g) tika ekstrahēti divreiz ar 70% etanolu (ar 2 stundu atteci), un pēc tam ekstrakts tika koncentrēts pazeminātā spiedienā. Novārījums tika filtrēts, liofilizēts un uzglabāts 4 ° C temperatūrā. Sausā ekstrakta iznākums no neapstrādātiem izejmateriāliem bija 48,13% (w/w).

2.2. Kvantitatīvā augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfijas (HPLC) analīze

Hromatogrāfiskā analīze tika veikta ar HPLC sistēmu (Waters Co., Milford, MA, ASV) un fotodiodes matricas detektoru. SDE HPLC analīzei primāraisO- glikozilcimifugīna standarts tika iegādāts no Korejas Tradicionālās medicīnas nozares veicināšanas institūta (Gyeongsan, Koreja), unsec-O-glikozilhamaudols un 4′-O-β-D-glikozil-5-O-metilvisamminols tika izolēts mūsu laboratorijā un identificēts ar spektrālām analīzēm, galvenokārt ar KMR un MS.

SDE paraugi (0, 1 mg) tika izšķīdināti 70% etanolā (10 ml). Hromatogrāfiskā atdalīšana tika veikta ar XSelect HSS T3 C18 kolonnu (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milforda, MA, ASV). Mobilā fāze sastāvēja no acetonitrila (A) un 0,1% etiķskābes ūdenī (B) ar plūsmas ātrumu 1,0 ml/min. Tika izmantota daudzpakāpju gradienta programma: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min) un 20–65% A (23–40 min. ). Noteikšanas viļņa garums tika skenēts pie 210–400 nm un reģistrēts pie 254 nm. Injekcijas tilpums bija 10,0μL. Standarta šķīdumi trīs hromonu noteikšanai tika sagatavoti ar galīgo koncentrāciju 7,781 mg/mL (prim-O-glikozilcimifugīns), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glikozil-5-O-metilvisaminols) un 31,125 mg/ml (sec-O-glikozilhamaudols) metanolā un tur 4°C temperatūrā.

2.3. Pretiekaisuma darbības novērtējumsIn vitro

2.3.1. Šūnu kultūra un paraugu apstrāde

RAW 264.7 šūnas tika iegūtas no American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, ASV) un audzētas DMEM barotnē, kas satur 1% antibiotiku un 5,5% FBS. Šūnas tika inkubētas mitrinātā atmosfērā ar 5% CO2 37 ° C temperatūrā. Lai stimulētu šūnas, barotne tika aizstāta ar svaigu DMEM barotni un lipopolisaharīdu (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., Sentluisa, MO, ASV) 1.μg/ml tika pievienots SDE klātbūtnē vai bez tās (200 vai 400μg/mL) vēl 24 stundas.

2.3.2. Slāpekļa oksīda (NO), prostaglandīna E2 (PGE2), audzēja nekrozes faktora noteikšanaα(TNF-α), un Interleikīna-6 (IL-6) ražošana

Šūnas tika apstrādātas ar SDE un stimulētas ar LPS 24 stundas. NO ražošana tika analizēta, mērot nitrītu, izmantojot Griess reaģentu saskaņā ar iepriekšējo pētījumu [12]. Iekaisuma citokīnu PGE2, TNF- sekrēcijaα, un IL-6 tika noteikts, izmantojot ELISA komplektu (R&D sistēmas) saskaņā ar ražotāja norādījumiem. SDE ietekme uz NO un citokīnu veidošanos tika noteikta pie 540 nm vai 450 nm, izmantojot Wallac EnVision™mikroplašu lasītājs (PerkinElmer).

2.4. Antiosteoartrīta aktivitātes novērtējumsIn Vivo

2.4.1. Dzīvnieki

Sprague-Dawley žurku tēviņi (7 nedēļas veci) tika iegādāti no Samtako Inc. (Osana, Koreja) un tika izmitināti kontrolētos apstākļos ar 12 stundu gaismas/tumsas ciklu plkst.°C un% mitrums. Žurkas tika nodrošinātas ar laboratorijas diētu un ūdeniad libitum. Visas eksperimentālās procedūras tika veiktas saskaņā ar Nacionālo veselības institūtu (NIH) vadlīnijām, un tās apstiprināja Tedžonas universitātes Dzīvnieku kopšanas un lietošanas komiteja (Daejeon, Korejas Republika).

2.4.2. OA indukcija ar MIA žurkām

Pirms pētījuma uzsākšanas dzīvnieki tika randomizēti un iedalīti ārstēšanas grupās (katrai grupai). MIA šķīdums (3 mg/50μL 0, 9% fizioloģiskā šķīduma) tika tieši injicēts labā ceļgala intraartikulārajā telpā ar anestēziju, ko izraisīja ketamīna un ksilazīna maisījums. Žurkas tika nejauši sadalītas četrās grupās: (1) sāls šķīduma grupa bez MIA injekcijas, (2) MIA grupa ar MIA injekciju, (3) grupa, kas ārstēta ar SDE (200 mg/kg) ar MIA injekciju un (4) ) ar indometacīnu (IM-) ārstētā grupa (2 mg/kg) ar MIA injekciju. Žurkas tika ievadītas iekšķīgi ar SDE un IM 1 nedēļu pirms MIA injekcijas 4 nedēļas. Šajā pētījumā izmantotās SDE un IM devas tika balstītas uz iepriekšējos pētījumos izmantotajām devām [10,13,14].

2.4.3. Aizmugurējās ķepas svara gultņu sadalījuma mērījumi

Pēc OA indukcijas tika izjaukts sākotnējais aizmugurējo ķepu svara nestspējas līdzsvars. Lai novērtētu svara nestspējas izmaiņas, tika izmantots nespējas testeris (Linton instrumentation, Norfolk, UK). Žurkas uzmanīgi ievietoja mērīšanas kamerā. Smagumu nesošais spēks, ko iedarbojas pakaļējā ekstremitāte, tika aprēķināts vidēji 3 sekunžu periodā. Svara sadalījuma attiecība tika aprēķināta, izmantojot šādu vienādojumu: [svars uz labās pakaļējās ekstremitātes/(svars uz labās pakaļējās ekstremitātes + svars uz kreisās pakaļējās ekstremitātes)] × 100 [15].

2.4.4. Seruma citokīnu līmeņa mērījumi

Asins paraugus centrifugēja ar 1500 g 10 minūtes 4 °C temperatūrā; tad serums tika savākts un uzglabāts -70 ° C temperatūrā līdz lietošanai. IL-1 līmenisβ, IL-6, TNF-α, un PGE2 serumā tika izmērīti, izmantojot ELISA komplektus no R&D Systems (Mineapolisa, MN, ASV) saskaņā ar ražotāja norādījumiem.

2.4.5. Reāllaika kvantitatīvā RT-PCR analīze

Kopējā RNS tika ekstrahēta no ceļa locītavas audiem, izmantojot TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ASV), reversā transkribēta cDNS un PCR pastiprināta, izmantojot TM One Step RT PCR komplektu ar SYBR zaļo (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, ASV). Reāllaika kvantitatīvā PCR tika veikta, izmantojot Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR sistēmu (Applied Biosystems, Grand Island, NY, ASV). Praimeru sekvences un zondes secība ir parādītas tabulā1. Paraugu cDNS alikvotas un vienāds daudzums GAPDH cDNS tika amplificētas ar TaqMan® Universal PCR galveno maisījumu, kas satur DNS polimerāzi saskaņā ar ražotāja norādījumiem (Applied Biosystems, Foster, CA, ASV). PCR apstākļi bija 2 minūtes 50 ° C temperatūrā, 10 minūtes 94 ° C temperatūrā, 15 s 95 ° C temperatūrā un 1 min 60 ° C temperatūrā 40 cikliem. Mērķa gēna koncentrācija tika noteikta, izmantojot salīdzinošo Ct (cikla sliekšņa numurs krustpunktā starp amplifikācijas diagrammu un slieksni) metodi saskaņā ar ražotāja norādījumiem.

FOB cena:0,5–9999 ASV dolāri/gab

Minimālais pasūtījuma daudzums:100 gab./gab

Piegādes spēja:10000 gab./gab. mēnesī

Nosūtiet mums e-pastu

Produkta informācija

Produktu etiķetes

Osteoartrīts (OA) ir visizplatītākā muskuļu un skeleta sistēmas slimība un visizplatītākā deģeneratīva locītavu slimība gados vecākiem cilvēkiem.1]. OA ir stāvoklis, ko daļēji izraisa traumas, skrimšļa struktūras un funkcijas zudums, kā arī pro-iekaisuma un pretiekaisuma ceļu regulēšanas traucējumi [2,3]. Tas galvenokārt ietekmē locītavu skrimšļus un sinoviālo locītavu subhondrālo kaulu, kā arī izraisa locītavu mazspēju, kas izraisa sāpes, nesot svaru, tostarp ejot un stāvot [4].

OA nevar izārstēt, jo ir ļoti grūti atjaunot skrimšļus, kad tie ir iznīcināti [5]. Ārstēšanas mērķi ir mazināt sāpes, saglabāt vai uzlabot locītavu kustīgumu, palielināt locītavu izturību un samazināt slimības invaliditāti. OA farmakoloģiskās ārstēšanas mērķis ir samazināt sāpes, lai uzlabotu pacienta locītavu darbību un dzīves kvalitāti. Lai gan skrimšļa iznīcināšana ir galvenais OA notikums, kolagēna degradācija ir galvenais notikums, kas nosaka OA neatgriezenisku progresēšanu saistībā ar iekaisumu.6,7]. Paredzams, ka ārstēšana ar pretiekaisuma un hondroprotektīvu darbību atvieglos sāpes un saglabās matricas integritāti OA pacientiem.

Tāpēc iekaisuma mazināšana, iespējams, būs noderīga OA pārvaldībā. Nesenie pētījumi liecina par augu resursu aizsargājošu lomu OA progresēšanā, lai mazinātu hondrocītu iekaisumu un turpmāku skrimšļa iznīcināšanu, pateicoties to spējai mijiedarboties ar ar locītavām saistītiem audiem, tādējādi mazinot locītavu sāpes.8].

Sakne noSaposhnikovia divaricataŠiškins (Umbelliferae) ir plaši izmantots tradicionālajā medicīnā galvassāpju, sāpju, iekaisuma un artrīta ārstēšanai Korejā un Ķīnā.9,10]. Daudzveidīgā farmakoloģiskā iedarbībaSaposhnikovia divaricata(SD) ietver arī pretiekaisuma, pretsāpju, pretdrudža un pretartrīta īpašības [9,11]. Nesenais pētījums parādīja, ka SD hromona ekstraktam piemīt potenciāla pretreimatoīdā artrīta iedarbība kolagēna izraisīta artrīta peles modelī.10]; tomēr ir veikti daži pētījumi, lai atbalstītu pretiekaisuma un pretartrīta darbībuSaposhnikovia divaricataekstrakts (SDE).

Tāpēc šajā pētījumā tika pētītas 70% SD etanola ekstrakta pretiekaisuma un antiosteoartrīta aktivitātes. Pirmkārt, tika novērtēta SDE pretiekaisuma iedarbībain vitroLPS inducētās RAW 264.7 šūnās. Pēc tam SDE antiosteoartrīta iedarbība tika mērīta, novērtējot svara sadalījumu, locītavu skrimšļa degradāciju un iekaisuma reakcijas mononātrija jodacetāta (MIA-) izraisītas OA žurku modelī.