-
Auksti spiesta organiskā jojobas eļļa jojobas sēklu nesējeļļa ādas kopšanas masāžai
Galvenās dabiskās jojobas eļļas sastāvdaļas ir palmitīnskābe, erukskābe, oleīnskābe un gadoleīnskābe. Jojobas eļļa ir arī bagāta ar vitamīniem, piemēram, E vitamīnu un B vitamīnu kompleksu.
Jojobas auga šķidrais augu vasks ir zeltainā krāsā. Jojobas augu eļļai ir raksturīgs riekstu aromāts, un tā ir ieteicama personīgās kopšanas līdzekļu, piemēram, krēmu, kosmētikas, šampūnu uc papildinājums. Jojobas augu eļļu var tieši uzklāt uz ādas saules apdegumu, psoriāzes un pūtīšu gadījumā. Tīra jojobas eļļa arī veicina matu augšanu.
-
Dabiskā tīrā organiskā lavandas ēteriskā eļļa aromterapijas ādas kopšanai
Ekstrakcijas vai apstrādes metode: destilēta ar tvaiku
Destilācijas ekstrakcijas daļa: Ziedi
Valsts izcelsme: Ķīna
Pielietojums: difūzā/aromterapija/masāža
Derīguma termiņš: 3 gadi
Pielāgots pakalpojums: pielāgota etiķete un kaste vai pēc jūsu prasības
Sertifikācija: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100% tīra dabīga organiskā magnolijas officimalis kortex eļļas ēteriskā eļļa ādas kopšanai
Hou Po aromāts ir uzreiz rūgtens un asi ass, pēc tam pakāpeniski atveras ar dziļu, sīrupainu saldumu un siltumu.
Hou Po ir saistīts ar Zemes un metāla elementiem, kur rūgtais siltums spēcīgi iedarbojas, lai pazeminātu Qi un sauso mitrumu. Šo īpašību dēļ to izmanto ķīniešu medicīnā, lai atvieglotu stagnāciju un uzkrāšanos gremošanas traktā, kā arī klepu un sēkšanu, ko izraisa plaušas nosprostojoša flegma.
Magnolia Officinials ir lapu koks, kura dzimtene ir Sičuaņas, Hubei un citu Ķīnas provinču kalnos un ielejās. Ļoti aromātiskā miza, ko izmanto tradicionālajā ķīniešu medicīnā, tiek noņemta no kātiem, zariem un saknēm. No aprīļa līdz jūnijam tiek savākta. Biezajai, gludajai mizai, smagnējai ar eļļu, iekšpusē ir purpursarkana krāsa ar kristālisku spīdumu.
Praktizētāji var apsvērt iespēju kombinēt Hou Po ar Qing Pi ēterisko eļļu kā izcilu komplimentu maisījumos, kuru mērķis ir izjaukt uzkrājumus.
-
OEM pielāgotā iepakojuma dabīgā Macrocephalae Rhizoma eļļa
Kā efektīvu ķīmijterapijas līdzekli 5-fluoruracilu (5-FU) plaši izmanto ļaundabīgu audzēju ārstēšanai kuņģa-zarnu traktā, galvā, kaklā, krūtīs un olnīcās. Un 5-FU ir pirmās līnijas zāles kolorektālā vēža ārstēšanai klīnikā. 5-FU darbības mehānisms ir bloķēt uracila nukleīnskābes transformāciju par timīna nukleīnskābi audzēja šūnās, pēc tam ietekmēt DNS un RNS sintēzi un atjaunošanos, lai panāktu tā citotoksisko iedarbību (Afzal et al., 2009; Ducreux et al. al., 2015; Longley et al., 2003). Tomēr 5-FU izraisa arī ķīmijterapijas izraisītu caureju (CID), kas ir viena no visbiežāk sastopamajām blakusparādībām, kas nomoka daudzus pacientus (Filho et al., 2016). Caurejas biežums pacientiem, kuri tika ārstēti ar 5-FU, bija līdz 50–80%, kas nopietni ietekmēja ķīmijterapijas gaitu un efektivitāti (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Līdz ar to ir ļoti svarīgi atrast efektīvu terapiju 5-FU izraisītai CID.
Pašlaik CID klīniskajā ārstēšanā ir importētas ar narkotikām nesaistītas iejaukšanās un narkotiku iejaukšanās. Ne-narkotiku iejaukšanās ietver saprātīgu uzturu un papildinājumu ar sāli, cukuru un citām uzturvielām. CID pretcaurejas terapijā parasti izmanto tādas zāles kā loperamīds un oktreotīds (Benson et al., 2004). Turklāt etnomedicīnas tiek pieņemtas arī CID ārstēšanai ar savu unikālo terapiju dažādās valstīs. Tradicionālā ķīniešu medicīna (TCM) ir viena tipiska etnomedicīna, kas Austrumāzijas valstīs, tostarp Ķīnā, Japānā un Korejā, ir praktizēta vairāk nekā 2000 gadus (Qi et al., 2010). TCM uzskata, ka ķīmijterapijas zāles izraisītu Qi patēriņu, liesas deficītu, kuņģa disharmoniju un endofītisku mitrumu, kā rezultātā rodas zarnu vadītspējas disfunkcija. TCM teorijā CID ārstēšanas stratēģijai galvenokārt jābūt atkarīgai no Qi papildināšanas un liesas stiprināšanas (Wang et al., 1994).
Žāvētas saknesAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) unPanax žeņšeņsCA Mey. (PG) ir tipiskas augu izcelsmes zāles TCM ar tādu pašu iedarbību, kas papildina Qi un stiprina liesu (Li et al., 2014). AM un PG parasti izmanto kā garšaugu pāri (vienkāršākā ķīniešu augu saderības forma), kas papildina Qi un stiprina liesu, lai ārstētu caureju. Piemēram, AM un PG tika dokumentēti klasiskās pretcaurejas formulās, piemēram, Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang no plkst.Taiping Huimin Heji Ju Fang(Dziesmu dinastija, Ķīna) un Bu Zhong Yi Qi Tang noPi Vei Luns(Juaņu dinastija, Ķīna) (1. att.). Vairāki iepriekšējie pētījumi ziņoja, ka visām trim formulām piemīt spēja mazināt CID (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Turklāt mūsu iepriekšējais pētījums parādīja, ka Shenzhu kapsulai, kas satur tikai AM un PG, ir iespējama ietekme uz caurejas, kolīta (xiexie sindroma) un citu kuņģa-zarnu trakta slimību ārstēšanu (Feng et al., 2018). Tomēr nevienā pētījumā nav apspriests AM un PG efekts un mehānisms CID ārstēšanā gan kombinācijā, gan atsevišķi.
Tagad tiek uzskatīts, ka zarnu mikrobiota ir potenciāls faktors, lai izprastu TCM terapeitisko mehānismu (Feng et al., 2019). Mūsdienu pētījumi liecina, ka zarnu mikrobiotai ir izšķiroša loma zarnu homeostāzes uzturēšanā. Veselīga zarnu mikrobiota veicina zarnu gļotādas aizsardzību, vielmaiņu, imūnās homeostāzi un reakciju, kā arī patogēnu nomākšanu (Thursby and Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Traucēta zarnu mikrobiota tieši vai netieši pasliktina cilvēka ķermeņa fizioloģiskās un imūnās funkcijas, izraisot blakusparādības, piemēram, caureju (Patel et al., 2016; Zhao and Shen, 2010). Pētījumi parādīja, ka 5-FU ievērojami mainīja zarnu mikrobiotas struktūru caurejas pelēm (Li et al., 2017). Tāpēc AM un PM ietekmi uz 5-FU izraisītu caureju var izraisīt zarnu mikrobiota. Tomēr joprojām nav zināms, vai AM un PG atsevišķi un kopā varētu novērst 5-FU izraisītu caureju, modulējot zarnu mikrobiotu.
Lai izpētītu AM un PG pretcaurejas efektus un pamatā esošo mehānismu, mēs izmantojām 5-FU, lai modelētu caurejas modeli pelēm. Šeit mēs koncentrējāmies uz vienas un kombinētās administrācijas (AP) iespējamo ietekmiAtractylodes macrocephalaēteriskā eļļa (AMO) unPanax žeņšeņskopējo saponīnu (PGS), aktīvās sastāvdaļas, kas attiecīgi ekstrahētas no AM un PG, par caureju, zarnu patoloģiju un mikrobu struktūru pēc 5-FU ķīmijterapijas.
-
100% tīra dabīga Eucommiae Foliuml Oil ēteriskā eļļa ādas kopšanai
Eucommia ulmoides(ES) (ķīniešu valodā parasti saukts par "Du Zhong") pieder pie Eucommiaceae dzimtas, mazo koku ģints, kuras dzimtene ir Centrālā Ķīna [1]. Šo augu Ķīnā plaši kultivē tā ārstnieciskās nozīmes dēļ. No ES ir izolēti aptuveni 112 savienojumi, tostarp lignāni, iridoīdi, fenoli, steroīdi un citi savienojumi. Šī auga papildu garšaugu formula (piemēram, garšīga tēja) ir parādījusi dažas ārstnieciskas īpašības. ES lapām ir lielāka aktivitāte saistībā ar garozu, ziediem un augļiem [2,3]. Ir ziņots, ka ES lapas uzlabo kaulu izturību un ķermeņa muskuļus [4], tādējādi nodrošinot cilvēku ilgmūžību un veicinot auglību [5]. Tika ziņots, ka garšīgā tējas formula, kas izgatavota no ES lapām, samazina taukainību un uzlabo enerģijas metabolismu. Ir ziņots, ka flavonoīdu savienojumi (piemēram, rutīns, hlorogēnskābe, ferulīnskābe un kofeīnskābe) uzrāda antioksidantu aktivitāti ES lapās.6].
Lai gan ir bijis pietiekami daudz literatūras par ES fitoķīmiskajām īpašībām, tomēr bija maz pētījumu par dažādu savienojumu, kas iegūti no ES mizām, sēklām, kātiem un lapām, farmakoloģiskajām īpašībām. Šajā pārskata dokumentā ar zinātniskiem pierādījumiem tiks izskaidrota detalizēta informācija par dažādiem savienojumiem, kas iegūti no dažādām ES daļām (mizām, sēklām, stublājiem un lapām), un šo savienojumu paredzamajiem lietojumiem veselību veicinošās īpašībās, un tādējādi tiks sniegts atsauces materiāls. ES piemērošanai.
-
Tīra dabīga Houttuynia Cordata eļļa Houttuynia Cordata Oil Lchthammolum Oil
Lielākajā daļā jaunattīstības valstu 70–95% iedzīvotāju primārajā veselības aprūpē paļaujas uz tradicionālajām zālēm, un no tām 85% cilvēku kā aktīvo vielu izmanto augus vai to ekstraktus.1] Jaunu bioloģiski aktīvo savienojumu meklēšana no augiem parasti ir atkarīga no specifiskās etniskās un tautas informācijas, kas iegūta no vietējiem praktiķiem, un joprojām tiek uzskatīta par nozīmīgu zāļu atklāšanas avotu. Indijā aptuveni 2000 zāļu ir augu izcelsmes.2] Ņemot vērā plašo interesi par ārstniecības augu izmantošanu, šis pārskats parHouttuynia cordataThunb. sniedz jaunāko informāciju, atsaucoties uz botāniskiem, komerciāliem, etnofarmakoloģiskiem, fitoķīmiskiem un farmakoloģiskiem pētījumiem, kas parādās literatūrā.H. cordataThunb. pieder ģimeneiSaururaceaeun parasti pazīstams kā ķīniešu ķirzakas aste. Tas ir daudzgadīgs lakstaugs ar stoloniferous sakneņiem, kam ir divi atšķirīgi ķīmijtipi.3,4] Ķīnas sugas ķīmijtips ir sastopams savvaļas un daļēji savvaļas apstākļos Indijas ziemeļaustrumos no aprīļa līdz septembrim.[5,6,7]H. cordatair pieejams Indijā, jo īpaši Asamas Brahmaputras ielejā, un to tradicionāli izmanto dažādas Asamas ciltis dārzeņu veidā, kā arī dažādiem medicīniskiem nolūkiem.
-
100% PureArctium lappa eļļa Ražotājs – Natural Lime Arctium lappa eļļa ar kvalitātes nodrošināšanas sertifikātiem
Ieguvumi veselībai
Diždadža sakni bieži ēd, taču to var arī žāvēt un iemērc tējā. Tas labi darbojas kā inulīna avots, aprebiotikasšķiedra, kas veicina gremošanu un uzlabo zarnu veselību. Turklāt šī sakne satur flavonoīdus (augu barības vielas),fitoķīmiskās vielas, un antioksidanti, par kuriem zināms, ka tiem ir labvēlīga ietekme uz veselību.
Turklāt diždadža sakne var sniegt citas priekšrocības, piemēram:
Samazināt hronisku iekaisumu Diždadža sakne satur vairākus antioksidantus, piemēram, kvercetīnu, fenolskābes un luteolīnu, kas var palīdzēt aizsargāt jūsu šūnas nobrīvie radikāļi. Šie antioksidanti palīdz mazināt iekaisumu visā ķermenī.
Veselības riski
Diždadža sakne tiek uzskatīta par drošu ēst vai dzert kā tēju. Tomēr šis augs ļoti atgādina Belladonna nakteņu augus, kas ir toksiski. Ieteicams iegādāties diždadža sakni tikai no uzticamiem pārdevējiem un atturēties no to savākšanas pašiem. Turklāt ir minimāla informācija par tā ietekmi uz bērniem vai grūtniecēm. Konsultējieties ar savu ārstu, pirms lietojat diždadža saknes bērniem vai ja esat grūtniece.
Šeit ir daži citi iespējamie veselības apdraudējumi, kas jāņem vērā, lietojot diždadža sakni:
Paaugstināta dehidratācija
Diždadža sakne darbojas kā dabisks diurētiķis, kas var izraisīt dehidratāciju. Ja lietojat ūdens tabletes vai citus diurētiskos līdzekļus, nevajadzētu lietot diždadža sakni. Ja lietojat šīs zāles, ir svarīgi būt informētam par citām zālēm, augiem un sastāvdaļām, kas var izraisīt dehidratāciju.
Alerģiska reakcija
Ja esat jutīgs vai jums ir bijušas alerģiskas reakcijas pret margrietiņām, ambrozijām vai krizantēmām, jums ir paaugstināts alerģiskas reakcijas risks pret diždadža sakni.
-
Vairumtirdzniecības cena 100% tīra AsariRadix Et Rhizoma eļļa Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Pētījumos ar dzīvniekiem un in vitro ir pētīta sassafras un tā sastāvdaļu iespējamā pretsēnīšu, pretiekaisuma un kardiovaskulārā iedarbība. Tomēr trūkst klīnisko pētījumu, un sassafras netiek uzskatīts par drošu lietošanai. ASV Pārtikas un zāļu pārvalde (FDA) ir aizliegusi safrolu, kas ir galvenā sassafras sakņu mizas un eļļas sastāvdaļa, tostarp izmantot kā aromatizētāju vai smaržvielu, un to nedrīkst lietot iekšēji vai ārēji, jo tas ir potenciāli kancerogēns. Safrols ir izmantots nelegālā 3,4-metilēndioksimetamfetamīna (MDMA), kas pazīstams arī ar ielu nosaukumiem “ecstasy” vai “Molly” ražošanā, un safrola un sassafras eļļas pārdošanu uzrauga ASV Narkotiku apkarošanas pārvalde.
-
Vairumtirdzniecības cena 100% Pure Stellariae Radix ēteriskā eļļa (jauna) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Ķīnas farmakopeja (2020. gada izdevums) nosaka, ka YCH metanola ekstraktam nevajadzētu būt mazākam par 20,0% [2], nenorādot citus kvalitātes novērtēšanas rādītājus. Šī pētījuma rezultāti liecina, ka gan savvaļas, gan kultivēto paraugu metanola ekstraktu saturs atbilda farmakopejas standartam, un starp tiem nebija būtisku atšķirību. Tāpēc saskaņā ar šo indeksu nebija acīmredzamas kvalitātes atšķirības starp savvaļas un kultivētajiem paraugiem. Tomēr kopējo sterīnu un kopējo flavonoīdu saturs savvaļas paraugos bija ievērojami augstāks nekā kultivētajos paraugos. Turpmākā metabolomiskā analīze atklāja bagātīgu metabolītu daudzveidību starp savvaļas un kultivētajiem paraugiem. Turklāt tika izsijāti 97 ievērojami atšķirīgi metabolīti, kas ir uzskaitītiPapildu tabula S2. Starp šiem ievērojami atšķirīgajiem metabolītiem ir β-sitosterīns (ID ir M397T42) un kvercetīna atvasinājumi (M447T204_2), par kuriem ziņots, ka tie ir aktīvās sastāvdaļas. Iepriekš nereģistrētas sastāvdaļas, piemēram, trigonelīns (M138T291_2), betaīns (M118T277_2), fustīns (M269T36), rotenons (M241T189), arktīns (M557T165) un logānskābe (M399T284), bija arī dažādu metabolītu vidū. Šiem komponentiem ir dažādas lomas antioksidācijā, pretiekaisuma, brīvo radikāļu attīrīšanā, pretvēža un aterosklerozes ārstēšanā, un tāpēc tie var būt jauni, domājami, jauni aktīvi komponenti YCH. Aktīvo sastāvdaļu saturs nosaka zāļu iedarbīgumu un kvalitāti [7]. Rezumējot, metanola ekstraktam kā vienīgajam YCH kvalitātes novērtēšanas indeksam ir daži ierobežojumi, un ir jāturpina izpētīt specifiskāki kvalitātes marķieri. Starp savvaļas un kultivētajiem YCH bija būtiskas atšķirības kopējo sterīnu, kopējo flavonoīdu un daudzu citu atšķirīgo metabolītu saturā; tāpēc starp tiem, iespējams, bija dažas kvalitātes atšķirības. Tajā pašā laikā jaunatklātajām potenciālajām YCH aktīvajām vielām varētu būt nozīmīga atsauces vērtība YCH funkcionālās bāzes izpētē un YCH resursu turpmākajā attīstībā.
Īstu ārstniecisko materiālu nozīme konkrētajā izcelsmes reģionā ir jau sen atzīta izcilas kvalitātes ķīniešu augu izcelsmes zāļu ražošanā [8]. Augsta kvalitāte ir būtisks oriģinālo ārstniecisko materiālu atribūts, un biotops ir svarīgs faktors, kas ietekmē šādu materiālu kvalitāti. Kopš YCH sāka lietot kā zāles, tajā ilgu laiku dominē savvaļas YCH. Pēc veiksmīgās YCH ieviešanas un pieradināšanas Ningxia 1980. gados Yinchaihu ārstniecisko materiālu avots pakāpeniski mainījās no savvaļas uz kultivētām YCH. Saskaņā ar iepriekšējo izmeklēšanu par YCH avotiem [9] un mūsu pētnieku grupas lauka izpētē konstatētas būtiskas atšķirības kultivēto un savvaļas ārstniecisko materiālu izplatības apgabalos. Savvaļas YCH galvenokārt tiek izplatītas Šaansji provinces Ningxia Hui autonomajā reģionā, kas atrodas blakus Iekšējās Mongolijas sausajai zonai un Ningsijas centrālajai daļai. Jo īpaši tuksneša stepe šajos apgabalos ir vispiemērotākā biotopa YCH augšanai. Turpretī kultivētais YCH galvenokārt tiek izplatīts uz dienvidiem no savvaļas izplatības apgabala, piemēram, Tongxin apgabalā (I kultivētais) un tā apkārtnē, kas ir kļuvis par lielāko audzēšanas un ražošanas bāzi Ķīnā, un Pengyang County (kultivētā II) , kas atrodas vairāk dienvidu apgabalā un ir vēl viena kultivētās YCH ražošanas zona. Turklāt abu iepriekšminēto kultivēto platību biotopi nav tuksneša stepes. Tāpēc papildus audzēšanas veidam būtiskas atšķirības ir arī savvaļas un kultivētās YCH biotopā. Biotops ir svarīgs faktors, kas ietekmē augu izcelsmes zāļu materiālu kvalitāti. Dažādi biotopi ietekmēs sekundāro metabolītu veidošanos un uzkrāšanos augos, tādējādi ietekmējot zāļu kvalitāti [10,11]. Tāpēc ievērojamās atšķirības kopējo flavonoīdu un kopējo sterīnu saturā un 53 metabolītu ekspresijā, ko mēs atklājām šajā pētījumā, varētu būt lauka apsaimniekošanas un biotopu atšķirību rezultāts.Viens no galvenajiem veidiem, kā vide ietekmē ārstniecisko materiālu kvalitāti, ir slodze uz avota augiem. Mērens vides stress mēdz stimulēt sekundāro metabolītu uzkrāšanos [12,13]. Augšanas/diferenciācijas līdzsvara hipotēze apgalvo, ka tad, kad barības vielas ir pietiekamā daudzumā, augi galvenokārt aug, turpretim, ja barības vielu trūkst, augi galvenokārt diferencējas un ražo vairāk sekundāro metabolītu.14]. Sausuma stress, ko izraisa ūdens trūkums, ir galvenais vides stress, ar ko saskaras augi sausos apgabalos. Šajā pētījumā kultivētās YCH ūdens stāvoklis ir bagātīgāks, un ikgadējais nokrišņu līmenis ir ievērojami augstāks nekā savvaļas YCH (ūdens krājums kultivētajam I bija apmēram 2 reizes lielāks nekā Wild; Cultivated II bija aptuveni 3,5 reizes lielāks nekā Wild ūdens krājumam ). Turklāt savvaļas vidē augsne ir smilšaina augsne, bet lauksaimniecības zemē – māla augsne. Salīdzinot ar mālu, smilšainai augsnei ir slikta ūdens aiztures spēja, un tā, visticamāk, pastiprina sausuma stresu. Tajā pašā laikā kultivēšanas procesu bieži pavadīja laistīšana, tāpēc sausuma stresa pakāpe bija zema. Savvaļas YCH aug skarbos dabīgos, sausos biotopos, un tāpēc tas var ciest no nopietnāka sausuma stresa.Osmoregulācija ir svarīgs fizioloģisks mehānisms, ar kuru augi tiek galā ar sausuma stresu, un alkaloīdi ir svarīgi osmotiskie regulatori augstākos augos.15]. Betaīni ir ūdenī šķīstoši alkaloīdu kvartārā amonija savienojumi un var darboties kā osmoprotektori. Sausuma stress var samazināt šūnu osmotisko potenciālu, savukārt osmoprotektori saglabā un uztur bioloģisko makromolekulu struktūru un integritāti, kā arī efektīvi mazina sausuma radīto kaitējumu augiem [16]. Piemēram, sausuma stresa apstākļos betaīna saturs cukurbietēs un Lycium barbarum ievērojami palielinājās [17,18]. Trigonelīns ir šūnu augšanas regulators, un sausuma stresa apstākļos tas var pagarināt augu šūnu ciklu, kavēt šūnu augšanu un izraisīt šūnu tilpuma samazināšanos. Relatīvais izšķīdušo vielu koncentrācijas pieaugums šūnā ļauj augam sasniegt osmotisko regulējumu un uzlabot tā spēju pretoties sausuma stresam.19]. JIA X [20] atklāja, ka, palielinoties sausuma stresam, Astragalus membranaceus (tradicionālās ķīniešu medicīnas avots) ražoja vairāk trigonelīna, kas regulē osmotisko potenciālu un uzlabo spēju pretoties sausuma stresam. Ir pierādīts, ka flavonoīdiem ir svarīga loma augu rezistencē pret sausuma stresu [21,22]. Liels skaits pētījumu ir apstiprinājuši, ka mērens sausuma stress veicināja flavonoīdu uzkrāšanos. Lang Duo-Yong et al. [23] salīdzināja sausuma stresa ietekmi uz YCH, kontrolējot ūdens noturības spēju uz lauka. Konstatēts, ka sausuma stress zināmā mērā kavē sakņu augšanu, bet mērenā un smagā sausuma stresā (40% lauka ūdens noturības spēja) kopējais flavonoīdu saturs YCH palielinājās. Tikmēr sausuma stresa apstākļos fitosterīni var darboties, lai regulētu šūnu membrānas plūstamību un caurlaidību, kavētu ūdens zudumu un uzlabotu stresa izturību [24,25]. Tāpēc palielināta kopējo flavonoīdu, kopējo sterīnu, betaīna, trigonelīna un citu sekundāro metabolītu uzkrāšanās savvaļas YCH var būt saistīta ar augstas intensitātes sausuma stresu.Šajā pētījumā KEGG ceļa bagātināšanas analīze tika veikta metabolītiem, kuri tika atklāti būtiski atšķirīgi starp savvaļas un kultivētajiem YCH. Bagātinātie metabolīti ietvēra tos, kas iesaistīti askorbāta un aldarāta metabolisma ceļos, aminoacil-tRNS biosintēzē, histidīna metabolismā un beta-alanīna metabolismā. Šie vielmaiņas ceļi ir cieši saistīti ar augu stresa rezistences mehānismiem. Tostarp askorbāta metabolismam ir svarīga loma augu antioksidantu ražošanā, oglekļa un slāpekļa metabolismā, stresa rezistencē un citās fizioloģiskās funkcijās.26]; aminoacil-tRNS biosintēze ir svarīgs proteīnu veidošanās ceļš [27,28], kas ir iesaistīts stresa izturīgu proteīnu sintēzē. Gan histidīna, gan β-alanīna ceļi var uzlabot augu toleranci pret vides stresu [29,30]. Tas vēl vairāk norāda, ka metabolītu atšķirības starp savvaļas un kultivēto YCH bija cieši saistītas ar stresa rezistences procesiem.Augsne ir materiālais pamats ārstniecības augu augšanai un attīstībai. Slāpeklis (N), fosfors (P) un kālijs (K) augsnē ir svarīgi barības elementi augu augšanai un attīstībai. Augsnes organiskās vielas satur arī N, P, K, Zn, Ca, Mg un citus ārstniecības augiem nepieciešamos makroelementus un mikroelementus. Pārmērīgs vai deficīts barības vielu daudzums vai nesabalansētas barības vielu attiecības ietekmēs augšanu un attīstību, kā arī ārstniecisko materiālu kvalitāti, un dažādiem augiem ir atšķirīgas barības vielu prasības [31,32,33]. Piemēram, zems N stress veicināja alkaloīdu sintēzi Isatis indigotica un labvēlīgi ietekmēja flavonoīdu uzkrāšanos tādos augos kā Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge un Dichondra repens Forst. Turpretim pārāk daudz N kavēja flavonoīdu uzkrāšanos tādās sugās kā Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis un Ginkgo biloba, un ietekmēja ārstniecisko materiālu kvalitāti.34]. P mēslojuma izmantošana bija efektīva, lai palielinātu glicirizskābes un dihidroacetona saturu Urālu lakricā.35]. Kad lietošanas daudzums pārsniedza 0,12 kg·m−2, kopējais flavonoīdu saturs Tussilago farfara samazinājās [36]. P mēslojuma izmantošanai bija negatīva ietekme uz polisaharīdu saturu tradicionālajā ķīniešu medicīnā rhizoma polygonati [37], bet K mēslojums bija efektīvs, lai palielinātu tā saponīnu saturu [38]. Divgadīgā Panax notoginseng augšanai un saponīnu uzkrāšanai vislabāk bija izmantot 450 kg·hm−2 K mēslojumu.39]. Attiecībā N:P:K = 2:2:1 kopējais hidrotermālā ekstrakta, harpagīda un harpagozīda daudzums bija vislielākais [40]. Augstā N, P un K attiecība bija labvēlīga, lai veicinātu Pogostemon cablin augšanu un palielinātu gaistošās eļļas saturu. Zema N, P un K attiecība palielināja Pogostemon kabīņu stublāju lapu eļļas galveno efektīvo komponentu saturu [41]. YCH ir neauglīgu augsni izturīgs augs, un tam varētu būt īpašas prasības pēc tādām barības vielām kā N, P un K. Šajā pētījumā, salīdzinot ar kultivēto YCH, savvaļas YCH augu augsne bija salīdzinoši neauglīga: augsnes saturs. organisko vielu kopējais N, kopējais P un kopējais K bija attiecīgi aptuveni 1/10, 1/2, 1/3 un 1/3 no kultivētajiem augiem. Tāpēc augsnes barības vielu atšķirības varētu būt vēl viens iemesls atšķirībām starp kultivētajā un savvaļas YCH konstatētajiem metabolītiem. Veibao Ma et al. [42] atklāja, ka noteikta daudzuma N mēslojuma un P mēslojuma izmantošana ievērojami uzlaboja sēklu ražu un kvalitāti. Tomēr uzturvielu elementu ietekme uz YCH kvalitāti nav skaidra, un ir jāturpina pētīt mēslošanas pasākumus, lai uzlabotu ārstniecisko materiālu kvalitāti.Ķīniešu augu izcelsmes zālēm ir šādas īpašības: “Labvēlīgi biotopi veicina ražu, un nelabvēlīgi biotopi uzlabo kvalitāti” [43]. Pakāpeniski pārejot no savvaļas uz kultivētu YCH, augu biotops mainījās no sausas un neauglīgas tuksneša stepes uz auglīgu lauksaimniecības zemi ar bagātīgāku ūdens daudzumu. Kultivētās YCH biotops ir pārāks un raža ir lielāka, kas palīdz apmierināt tirgus pieprasījumu. Tomēr šis izcilais biotops izraisīja būtiskas izmaiņas YCH metabolītos; vai tas veicina YCH kvalitātes uzlabošanu un kā ar zinātniski pamatotiem audzēšanas pasākumiem panākt kvalitatīvu YCH ražošanu, būs jāveic turpmāki pētījumi.Simulatīva biotopu kultivēšana ir savvaļas ārstniecības augu biotopu un vides apstākļu simulācijas metode, kas balstās uz zināšanām par augu ilgtermiņa pielāgošanos specifiskiem vides faktoriem.43]. Simulējot dažādus vides faktorus, kas ietekmē savvaļas augus, jo īpaši to augu sākotnējo dzīvotni, ko izmanto kā autentisku ārstniecisko materiālu avotus, pieeja izmanto zinātnisku dizainu un novatorisku cilvēka iejaukšanos, lai līdzsvarotu Ķīnas ārstniecības augu augšanu un sekundāro metabolismu.43]. Metožu mērķis ir panākt optimālus pasākumus augstas kvalitātes ārstniecisko materiālu izstrādei. Simulatīvai biotopu audzēšanai vajadzētu nodrošināt efektīvu veidu YCH augstas kvalitātes ražošanai pat tad, ja farmakodinamiskā bāze, kvalitātes marķieri un reakcijas mehānismi uz vides faktoriem ir neskaidri. Attiecīgi mēs iesakām veikt zinātniskās plānošanas un lauku apsaimniekošanas pasākumus YCH audzēšanā un ražošanā, ņemot vērā savvaļas YCH vides īpašības, piemēram, sausos, neauglīgos un smilšainās augsnes apstākļus. Vienlaikus ir arī cerība, ka pētnieki veiks padziļinātākus pētījumus par YCH funkcionālo materiālu bāzi un kvalitātes marķieriem. Šie pētījumi var nodrošināt efektīvākus YCH vērtēšanas kritērijus, veicināt kvalitatīvu ražošanu un ilgtspējīgu nozares attīstību. -
Herbal Fructus Amomi eļļa Dabiskā masāža Difuzori 1kg Bulk Amomum villosum ēteriskā eļļa
Zingiberaceae dzimta ir piesaistījusi arvien lielāku uzmanību allelopātiskajos pētījumos, pateicoties bagātīgajām gaistošajām eļļām un tās pārstāvju sugu aromātiskumam. Iepriekšējie pētījumi parādīja, ka ķīmiskās vielas no Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] un Zingiber officinale Rosc. [42] no ingveru dzimtas ir alelopātiska ietekme uz kukurūzas, salātu un tomātu sēklu dīgtspēju un sēklu augšanu. Mūsu pašreizējais pētījums ir pirmais ziņojums par A. villosum (Zingiberaceae dzimtas loceklis) stublāju, lapu un jauno augļu gaistošo vielu alelopātisko aktivitāti. Eļļas raža no stublājiem, lapām un jauniem augļiem bija attiecīgi 0,15%, 0,40% un 0,50%, kas liecina, ka augļi veidoja lielāku daudzumu gaistošo eļļu nekā stublāji un lapas. Galvenās gaistošo eļļu sastāvdaļas no kātiem bija β-pinēns, β-fellandrēns un α-pinēns, kas bija līdzīgs lapu eļļas galvenajām ķīmiskajām vielām β-pinēnam un α-pinēnam (monoterpēna ogļūdeņraži). No otras puses, eļļa jaunos augļos bija bagāta ar bornilacetātu un kamparu (skābekli saturošiem monoterpēniem). Rezultātus apstiprināja Do N Dai [30,32] un Hui Ao [31], kurš bija identificējis eļļas no dažādiem A. villosum orgāniem.
Ir bijuši vairāki ziņojumi par šo galveno savienojumu augu augšanu inhibējošo darbību citās sugās. Šalinders Kaurs atklāja, ka α-pinēns no eikalipta ievērojami nomāca Amaranthus viridis L. saknes garumu un dzinumu augstumu 1,0 μl koncentrācijā [43], un cits pētījums parādīja, ka α-pinēns kavē agrīnu sakņu augšanu un izraisīja oksidatīvus bojājumus sakņu audos, palielinot reaktīvo skābekļa sugu veidošanos [44]. Dažos ziņojumos ir apgalvots, ka β-pinēns kavē testa nezāļu dīgtspēju un sējeņu augšanu atkarībā no devas, izjaucot membrānas integritāti.45], mainot augu bioķīmiju un pastiprinot peroksidāžu un polifenoloksidāžu aktivitātes [46]. β-fellandrēnam bija maksimāla Vigna unguiculata (L.) Walp dīgtspējas un augšanas kavēšana 600 ppm koncentrācijā [47], savukārt kampars koncentrācijā 250 mg/m3 nomāca Lepidium sativum L radikāļu un dzinumu augšanu.48]. Tomēr pētījumi, kas ziņo par bornilacetāta alelopātisko efektu, ir niecīgi. Mūsu pētījumā β-pinēna, bornilacetāta un kampara alelopātiskā ietekme uz sakņu garumu bija vājāka nekā gaistošajām eļļām, izņemot α-pinēnu, savukārt lapu eļļa, kas bagāta ar α-pinēnu, bija arī fitotoksiskāka nekā atbilstošā gaistošā eļļa. eļļas no A. villosum kātiem un augļiem, abi atklājumi liecina, ka α-pinēns varētu būt svarīga ķīmiska viela šīs sugas alelopātijai. Tajā pašā laikā rezultāti arī liecināja, ka daži savienojumi augļu eļļā, kas nebija daudz, varētu veicināt fitotoksiskās iedarbības veidošanos, un tas ir konstatējums, kas nākotnē ir jāpēta.Normālos apstākļos aleloķīmisko vielu alelopātiskā iedarbība ir sugai raksturīga. Jiang et al. konstatēja, ka ēteriskā eļļa, ko ražo Artemisia sieversiana, iedarbojas spēcīgāk uz Amaranthus retroflexus L. nekā uz Medicago sativa L., Poa annua L. un Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng. [49]. Citā pētījumā Lavandula angustifolia Mill. radīja dažādas pakāpes fitotoksisku ietekmi uz dažādām augu sugām. Lolium multiflorum Lam. bija visjutīgākā akceptoru suga, hipokotila un radikāļu augšana tika kavēta attiecīgi par 87,8% un 76,7%, lietojot 1 μL/mL eļļas, bet gurķu stādu hipokotila augšanu gandrīz neietekmēja [20]. Mūsu rezultāti arī parādīja, ka L. sativa un L. perenne jutība pret A. villosum gaistošajām vielām atšķiras.Vienas sugas gaistošie savienojumi un ēteriskās eļļas var atšķirties kvantitatīvi un/vai kvalitatīvi augšanas apstākļu, augu daļu un noteikšanas metožu dēļ. Piemēram, ziņojums parādīja, ka piranoīds (10,3%) un β-kariofilēns (6,6%) bija galvenie Sambucus nigra lapu gaistošo vielu savienojumi, savukārt benzaldehīds (17,8%), α-bulnesēns (16,6%) un tetrakozāns. (11,5%) bija daudz eļļās, kas iegūtas no lapām [50]. Mūsu pētījumā gaistošajiem savienojumiem, ko izdala svaigi augu materiāli, bija spēcīgāka alelopātiskā ietekme uz testa augiem nekā ekstrahētām gaistošajām eļļām, un atbildes reakcijas atšķirības bija cieši saistītas ar atšķirībām aleloķīmiskajās vielās, kas atrodas abos preparātos. Precīzas atšķirības starp gaistošajiem savienojumiem un eļļām ir jāturpina pētīt turpmākajos eksperimentos.Atšķirības mikrobu daudzveidībā un mikrobu kopienas struktūrā augsnes paraugos, kuriem bija pievienotas gaistošās eļļas, bija saistītas ar konkurenci starp mikroorganismiem, kā arī ar jebkādu toksisku ietekmi un gaistošo eļļu ilgumu augsnē. Vokou un Liotiri [51] atklāja, ka attiecīgi četru ēterisko eļļu (0,1 ml) uzklāšana kultivētajā augsnē (150 g) aktivizēja augsnes paraugu elpošanu, pat eļļām atšķiras ķīmiskais sastāvs, kas liecina, ka augu eļļas tiek izmantotas kā oglekļa un enerģijas avots. sastopamie augsnes mikroorganismi. Pašreizējā pētījumā iegūtie dati apstiprināja, ka eļļas no visa A. villosum auga veicināja acīmredzamu augsnes sēnīšu sugu skaita pieaugumu 14. dienā pēc eļļas pievienošanas, norādot, ka eļļa var nodrošināt oglekļa avotu vairāk. augsnes sēnītes. Citā pētījumā tika ziņots par konstatējumu: augsnes mikroorganismi atguva savu sākotnējo funkciju un biomasu pēc īslaicīga izmaiņu perioda, ko izraisīja Thymbra capitata L. (Cav) eļļas pievienošana, bet eļļa ar lielāko devu (0,93 µL eļļas uz gramu augsnes) neļāva augsnes mikroorganismiem atgūt sākotnējo funkcionalitāti [52]. Pašreizējā pētījumā, pamatojoties uz augsnes mikrobioloģisko analīzi pēc apstrādes ar dažādām dienām un koncentrācijām, mēs spekulējām, ka augsnes baktēriju kopiena atjaunosies pēc vairākām dienām. Turpretim sēnīšu mikrobiota nevar atgriezties sākotnējā stāvoklī. Šo hipotēzi apstiprina šādi rezultāti: augstas eļļas koncentrācijas atšķirīgā ietekme uz augsnes sēnīšu mikrobioma sastāvu tika atklāta ar galveno koordinātu analīzi (PCoA), un siltuma kartes prezentācijas vēlreiz apstiprināja, ka augsnes sēnīšu kopienas sastāvs. apstrādāts ar 3,0 mg/ml eļļas (proti, 0,375 mg eļļas uz gramu augsnes) ģints līmenī ievērojami atšķīrās no citiem apstrādes veidiem. Pašlaik pētījumi par monoterpēnu ogļūdeņražu vai skābekli saturošu monoterpēnu pievienošanas ietekmi uz augsnes mikrobu daudzveidību un kopienas struktūru joprojām ir ierobežoti. Dažos pētījumos ziņots, ka α-pinēns palielināja augsnes mikrobu aktivitāti un Methylophilaceae (metilotrofu grupa, proteobaktērijas) relatīvo daudzumu zemā mitruma saturā, kam ir svarīga loma kā oglekļa avotam sausākās augsnēs.53]. Tāpat A. villosum visa auga gaistošā eļļa, kas satur 15,03% α-pinēna (Papildu tabula S1), acīmredzami palielināja proteobaktēriju relatīvo daudzumu pie 1, 5 mg / ml un 3, 0 mg / ml, kas liecināja, ka α-pinēns, iespējams, darbojas kā viens no augsnes mikroorganismu oglekļa avotiem.Gaistošajiem savienojumiem, ko ražo dažādi A. villosum orgāni, bija dažādas pakāpes alelopātiska iedarbība uz L. sativa un L. perenne, kas bija cieši saistīta ar ķīmiskajām sastāvdaļām, kuras saturēja A. villosum augu daļas. Lai gan gaistošās eļļas ķīmiskais sastāvs tika apstiprināts, A. villosum istabas temperatūrā izdalītie gaistošie savienojumi nav zināmi, un tiem nepieciešama turpmāka izpēte. Turklāt ir vērts apsvērt arī dažādu aleloķīmisko vielu sinerģisko efektu. Attiecībā uz augsnes mikroorganismiem, lai visaptveroši izpētītu gaistošās eļļas ietekmi uz augsnes mikroorganismiem, mums joprojām ir jāveic padziļināti pētījumi: jāpagarina gaistošās eļļas apstrādes laiks un jānoskaidro gaistošās eļļas ķīmiskā sastāva izmaiņas augsnē. dažādās dienās. -
Tīra Artemisia capillaris eļļa sveču un ziepju izgatavošanai vairumtirdzniecības difuzora ēteriskā eļļa jaunums niedru degļu difuzoriem
Grauzēju modeļa dizains
Dzīvnieki tika nejauši sadalīti piecās grupās pa piecpadsmit pelēm katrā. Kontroles grupas un modeļa grupas pelēm tika veikta barošana ar zondisezama eļļauz 6 dienām. Pozitīvās kontroles grupas peles 6 dienas tika barotas ar bifendāta tabletēm (BT, 10 mg/kg). Eksperimentālās grupas 6 dienas tika apstrādātas ar 100 mg/kg un 50 mg/kg AEO, kas izšķīdināts sezama eļļā. 6. dienā kontroles grupa tika apstrādāta ar sezama eļļu, bet visas pārējās grupas tika apstrādātas ar vienu 0,2% CCl4 devu sezama eļļā (10 ml/kg).intraperitoneāla injekcija. Pēc tam peles tika tukšā dūšā bez ūdens, un asins paraugi tika savākti no retrobulbārajiem traukiem; savāktās asinis tika centrifugētas ar ātrumu 3000 ×g10 minūtes, lai atdalītu serumu.Dzemdes kakla dislokācijatika veikta tūlīt pēc asiņu noņemšanas, un aknu paraugi tika nekavējoties izņemti. Viena daļa aknu parauga tika nekavējoties uzglabāta -20 ° C temperatūrā līdz analīzei, bet otra daļa tika izgriezta un fiksēta 10%formalīnsrisinājums; Atlikušie audi histopatoloģiskai analīzei tika uzglabāti -80 ° C temperatūrā (Wang et al., 2008,Hsu et al., 2009,Nie et al., 2015).
Bioķīmisko parametru mērīšana serumā
Aknu bojājums tika novērtēts, novērtējotfermentatīvās aktivitātesseruma ALT un AST, izmantojot atbilstošos komerciālos komplektus saskaņā ar komplektu instrukcijām (Nanjing, Dzjansu province, Ķīna). Fermentatīvās aktivitātes tika izteiktas kā vienības litrā (U/l).
MDA, SOD, GSH un GSH-P mērīšanaxaknu homogenātos
Aknu audi tika homogenizēti ar aukstu fizioloģisko fizioloģisko šķīdumu proporcijā 1:9 (m/v, aknas: fizioloģiskais šķīdums). Homogenāti tika centrifugēti (2500 ×g10 minūtes), lai savāktu supernatantus turpmākajām noteikšanām. Aknu bojājumi tika novērtēti pēc MDA un GSH līmeņa aknu mērījumiem, kā arī SOD un GSH-Pxaktivitātes. Tie visi tika noteikti, ievērojot komplektā sniegtos norādījumus (Nanjing, Dzjansu province, Ķīna). MDA un GSH rezultāti tika izteikti kā nmol uz mg proteīna (nmol/mg prot) un SOD un GSH-P aktivitātesxtika izteiktas kā U uz mg proteīna (U/mg prot).
Histopatoloģiskā analīze
Svaigi iegūto aknu daļas tika fiksētas 10% buferšķīdumāparaformaldehīdsfosfāta šķīdums. Pēc tam paraugs tika iestrādāts parafīnā, sagriezts 3–5 μm sekcijās, iekrāsots arhematoksilīnsuneozīns(H&E) saskaņā ar standarta procedūru un visbeidzot analizējagaismas mikroskopija(Tian et al., 2012).
Statistiskā analīze
Rezultāti tika izteikti kā vidējā ± standartnovirze (SD). Rezultāti tika analizēti, izmantojot statistikas programmu SPSS Statistics, versiju 19.0. Dati tika pakļauti dispersijas analīzei (ANOVA,p< 0,05), kam seko Daneta tests un Daneta T3 tests, lai noteiktu statistiski nozīmīgas atšķirības starp dažādu eksperimentālo grupu vērtībām. Būtiska atšķirība tika ņemta vērā līmenīp< 0,05.
Rezultāti un diskusija
AEO sastāvdaļas
Veicot GC/MS analīzi, tika konstatēts, ka AEO satur 25 sastāvdaļas, kas eluētas no 10 līdz 35 minūtēm, un tika identificēta 21 sastāvdaļa, kas veido 84% no ēteriskās eļļas (1. tabula). Sastāvā esošā gaistošā eļļamonoterpenoīdi(80,9%), seskviterpenoīdi (9,5%), piesātinātie nesazarotie ogļūdeņraži (4,86%) un dažādi acetilēns (4,86%). Salīdzinot ar citiem pētījumiem (Guo et al., 2004), mēs AEO atradām daudz monoterpenoīdu (80, 90%). Rezultāti parādīja, ka visizplatītākā AEO sastāvdaļa ir β-citronelols (16,23%). Citas galvenās AEO sastāvdaļas ir 1,8-cineols (13,9%),kampars(12,59%),linalols(11,33%), α-pinēns (7,21%), β-pinēns (3,99%),timols(3,22%), unmircēns(2,02%). Ķīmiskā sastāva izmaiņas var būt saistītas ar vides apstākļiem, kuriem augs bija pakļauts, piemēram, minerālūdeni, saules gaismu, attīstības stadiju unuzturs.
-
Tīra Saposhnikovia divaricata eļļa sveču un ziepju izgatavošanai vairumtirdzniecības difuzora ēteriskā eļļa jaunums niedru degļu difuzoriem
2.1. SDE sagatavošana
SD sakneņi tika iegādāti kā kaltēts garšaugs no Hanherb Co. (Guri, Koreja). Augu materiālus taksonomiski apstiprināja Dr. Go-Ya Choi no Korejas Austrumu medicīnas institūta (KIOM). Kupona paraugs (numurs 2014 SDE-6) tika deponēts Korejas standarta augu resursu herbārijā. Žāvēti SD sakneņi (320 g) tika ekstrahēti divreiz ar 70% etanolu (ar 2 stundu atteci), un pēc tam ekstrakts tika koncentrēts pazeminātā spiedienā. Novārījums tika filtrēts, liofilizēts un uzglabāts 4 ° C temperatūrā. Sausā ekstrakta iznākums no neapstrādātiem izejmateriāliem bija 48,13% (w/w).
2.2. Kvantitatīvā augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfijas (HPLC) analīze
Hromatogrāfiskā analīze tika veikta ar HPLC sistēmu (Waters Co., Milford, MA, ASV) un fotodiodes matricas detektoru. SDE HPLC analīzei primāraisO- glikozilcimifugīna standarts tika iegādāts no Korejas Tradicionālās medicīnas nozares veicināšanas institūta (Gyeongsan, Koreja), unsec-O-glikozilhamaudols un 4′-O-β-D-glikozil-5-O-metilvisamminols tika izolēts mūsu laboratorijā un identificēts ar spektrālām analīzēm, galvenokārt ar KMR un MS.
SDE paraugi (0, 1 mg) tika izšķīdināti 70% etanolā (10 ml). Hromatogrāfiskā atdalīšana tika veikta ar XSelect HSS T3 C18 kolonnu (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milforda, MA, ASV). Mobilā fāze sastāvēja no acetonitrila (A) un 0,1% etiķskābes ūdenī (B) ar plūsmas ātrumu 1,0 ml/min. Tika izmantota daudzpakāpju gradienta programma: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min) un 20–65% A (23–40 min. ). Noteikšanas viļņa garums tika skenēts pie 210–400 nm un reģistrēts pie 254 nm. Injekcijas tilpums bija 10,0μL. Standarta šķīdumi trīs hromonu noteikšanai tika sagatavoti ar galīgo koncentrāciju 7,781 mg/mL (prim-O-glikozilcimifugīns), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glikozil-5-O-metilvisaminols) un 31,125 mg/ml (sec-O-glikozilhamaudols) metanolā un tur 4°C temperatūrā.
2.3. Pretiekaisuma darbības novērtējumsIn vitro
2.3.1. Šūnu kultūra un paraugu apstrāde
RAW 264.7 šūnas tika iegūtas no American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA, ASV) un audzētas DMEM barotnē, kas satur 1% antibiotiku un 5,5% FBS. Šūnas tika inkubētas mitrinātā atmosfērā ar 5% CO2 37 ° C temperatūrā. Lai stimulētu šūnas, barotne tika aizstāta ar svaigu DMEM barotni un lipopolisaharīdu (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., Sentluisa, MO, ASV) 1.μg/ml tika pievienots SDE klātbūtnē vai bez tās (200 vai 400μg/mL) vēl 24 stundas.
2.3.2. Slāpekļa oksīda (NO), prostaglandīna E2 (PGE2), audzēja nekrozes faktora noteikšanaα(TNF-α), un Interleikīna-6 (IL-6) ražošana
Šūnas tika apstrādātas ar SDE un stimulētas ar LPS 24 stundas. NO ražošana tika analizēta, mērot nitrītu, izmantojot Griess reaģentu saskaņā ar iepriekšējo pētījumu [12]. Iekaisuma citokīnu PGE2, TNF- sekrēcijaα, un IL-6 tika noteikts, izmantojot ELISA komplektu (R&D sistēmas) saskaņā ar ražotāja norādījumiem. SDE ietekme uz NO un citokīnu veidošanos tika noteikta pie 540 nm vai 450 nm, izmantojot Wallac EnVision™mikroplašu lasītājs (PerkinElmer).
2.4. Antiosteoartrīta aktivitātes novērtējumsIn Vivo
2.4.1. Dzīvnieki
Sprague-Dawley žurku tēviņi (7 nedēļas veci) tika iegādāti no Samtako Inc. (Osana, Koreja) un tika izmitināti kontrolētos apstākļos ar 12 stundu gaismas/tumsas ciklu plkst.°C un% mitrums. Žurkas tika nodrošinātas ar laboratorijas diētu un ūdeniad libitum. Visas eksperimentālās procedūras tika veiktas saskaņā ar Nacionālo veselības institūtu (NIH) vadlīnijām, un tās apstiprināja Tedžonas universitātes Dzīvnieku kopšanas un lietošanas komiteja (Daejeon, Korejas Republika).
2.4.2. OA indukcija ar MIA žurkām
Pirms pētījuma uzsākšanas dzīvnieki tika randomizēti un iedalīti ārstēšanas grupās (katrai grupai). MIA šķīdums (3 mg/50μL 0, 9% fizioloģiskā šķīduma) tika tieši injicēts labā ceļgala intraartikulārajā telpā ar anestēziju, ko izraisīja ketamīna un ksilazīna maisījums. Žurkas tika nejauši sadalītas četrās grupās: (1) sāls šķīduma grupa bez MIA injekcijas, (2) MIA grupa ar MIA injekciju, (3) grupa, kas ārstēta ar SDE (200 mg/kg) ar MIA injekciju un (4) ) ar indometacīnu (IM-) ārstētā grupa (2 mg/kg) ar MIA injekciju. Žurkas tika ievadītas iekšķīgi ar SDE un IM 1 nedēļu pirms MIA injekcijas 4 nedēļas. Šajā pētījumā izmantotās SDE un IM devas tika balstītas uz iepriekšējos pētījumos izmantotajām devām [10,13,14].
2.4.3. Aizmugurējās ķepas svara gultņu sadalījuma mērījumi
Pēc OA indukcijas tika izjaukts sākotnējais aizmugurējo ķepu svara nestspējas līdzsvars. Lai novērtētu svara nestspējas izmaiņas, tika izmantots nespējas testeris (Linton instrumentation, Norfolk, UK). Žurkas uzmanīgi ievietoja mērīšanas kamerā. Smagumu nesošais spēks, ko iedarbojas pakaļējā ekstremitāte, tika aprēķināts vidēji 3 sekunžu periodā. Svara sadalījuma attiecība tika aprēķināta, izmantojot šādu vienādojumu: [svars uz labās pakaļējās ekstremitātes/(svars uz labās pakaļējās ekstremitātes + svars uz kreisās pakaļējās ekstremitātes)] × 100 [15].
2.4.4. Seruma citokīnu līmeņa mērījumi
Asins paraugus centrifugēja ar 1500 g 10 minūtes 4 °C temperatūrā; tad serums tika savākts un uzglabāts -70 ° C temperatūrā līdz lietošanai. IL-1 līmenisβ, IL-6, TNF-α, un PGE2 serumā tika izmērīti, izmantojot ELISA komplektus no R&D Systems (Mineapolisa, MN, ASV) saskaņā ar ražotāja norādījumiem.
2.4.5. Reāllaika kvantitatīvā RT-PCR analīze
Kopējā RNS tika ekstrahēta no ceļa locītavas audiem, izmantojot TRI reagent® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, ASV), reversā transkribēta cDNS un PCR pastiprināta, izmantojot TM One Step RT PCR komplektu ar SYBR zaļo (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, ASV). Reāllaika kvantitatīvā PCR tika veikta, izmantojot Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR sistēmu (Applied Biosystems, Grand Island, NY, ASV). Praimeru sekvences un zondes secība ir parādītas tabulā1. Paraugu cDNS alikvotas un vienāds daudzums GAPDH cDNS tika amplificētas ar TaqMan® Universal PCR galveno maisījumu, kas satur DNS polimerāzi saskaņā ar ražotāja norādījumiem (Applied Biosystems, Foster, CA, ASV). PCR apstākļi bija 2 minūtes 50 ° C temperatūrā, 10 minūtes 94 ° C temperatūrā, 15 s 95 ° C temperatūrā un 1 min 60 ° C temperatūrā 40 cikliem. Mērķa gēna koncentrācija tika noteikta, izmantojot salīdzinošo Ct (cikla sliekšņa numurs krustpunktā starp amplifikācijas diagrammu un slieksni) metodi saskaņā ar ražotāja norādījumiem.
