Ēterisko eļļu vairumtirdzniecības rūpnīca | Ķīnas ēterisko eļļu vairumtirdzniecības ražotāji un piegādātāji

Aromterapijas tīra dabīga eikalipta lapu ēteriskā eļļa ķermeņa ādas kopšanai

Ekstrakcijas vai apstrādes metode: destilēts ar tvaiku

Destilācijas ekstrakcijas daļa: lapa

Izcelsmes valsts: Ķīna

Lietošana: difūzija/aromterapija/masāža

Derīguma termiņš: 3 gadi

Pielāgots pakalpojums: pielāgota etiķete un kaste vai kā jūsu prasība

Sertifikācija: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

Eikalipta eļļa reaģē ar gļotām un tās atšķaida, sniedzot tūlītēju atvieglojumu no elpas trūkuma un citām elpošanas problēmām. Tā ir pietiekami spēcīga, lai darbotos kā kukaiņu atbaidīšanas līdzeklis. Lietojot aromterapijā, tā nodrošina domu skaidrību. Tās terapeitiskās priekšrocības ir saistītas ar pretmikrobu, antibakteriālajām, antiseptiskajām, spazmolītiskajām un pretvīrusu īpašībām. Lietojiet eikalipta eļļu dažādu ādas un veselības problēmu ārstēšanai. Tā satur eikaliptolu, kas pazīstams arī kā cineols. Šis savienojums atbalstīs jūsu vispārējo veselību un labsajūtu.

detaļa
Dabīga, tīra organiskā lavandas ēteriskā eļļa aromterapijas ādas kopšanai

Ekstrakcijas vai apstrādes metode: destilēts ar tvaiku

Destilācijas ekstrakcijas daļa: zieds

Izcelsmes valsts: Ķīna

Lietošana: difūzija/aromterapija/masāža

Derīguma termiņš: 3 gadi

Pielāgots pakalpojums: pielāgota etiķete un kaste vai kā jūsu prasība

Sertifikācija: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA

detaļa
100% tīra dabīga organiskā Magnoliae Officmalis Cortex eļļa ēteriskā eļļa ādas kopšanai

Hou Po aromāts ir uzreiz rūgts un asi ass, pēc tam pakāpeniski atveras ar dziļu, sīrupainu saldumu un siltumu.

Hou Po ir radniecīgs Zemes un Metāla elementiem, kur tā rūgtais siltums spēcīgi iedarbojas uz ci un sauso mitrumu. Šo īpašību dēļ to izmanto ķīniešu medicīnā, lai mazinātu stagnāciju un uzkrāšanos gremošanas traktā, kā arī klepu un sēkšanu, ko izraisa krēpas, kas aizsprosto plaušas.

Magnolia Officinials ir lapu koks, kura dzimtene ir Sičuaņas, Hubei un citu Ķīnas provinču kalni un ielejas. Tradicionālajā ķīniešu medicīnā izmantotā ļoti aromātiskā miza tiek noņemta no kātiem, zariem un saknēm, un to vāc no aprīļa līdz jūnijam. Biezā, gludā, eļļas piesātinātā miza iekšpusē ir purpursarkanā krāsā ar kristālam līdzīgu spīdumu.

Praktizētāji var apsvērt Hou Po apvienošanu ar Qing Pi ēterisko eļļu kā augšējās nots papildinājumu maisījumos, kuru mērķis ir sadalīt uzkrāšanos.

detaļa
OEM pasūtījuma iepakojums dabīgā Macrocephalae Rhizoma eļļa

Kā efektīvs ķīmijterapijas līdzeklis, 5-fluoruracils (5-FU) tiek plaši pielietots ļaundabīgu audzēju ārstēšanai kuņģa-zarnu traktā, galvā, kaklā, krūtīs un olnīcās. Un 5-FU ir pirmās izvēles zāles kolorektālā vēža ārstēšanā klīnikā. 5-FU darbības mehānisms ir bloķēt uracila nukleīnskābes pārveidošanos par timīna nukleīnskābi audzēja šūnās, pēc tam ietekmēt DNS un RNS sintēzi un atjaunošanu, lai panāktu citotoksisko efektu (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). Tomēr 5-FU izraisa arī ķīmijterapijas izraisītu caureju (CID), kas ir viena no visbiežāk sastopamajām blakusparādībām, kas moka daudzus pacientus (Filho et al., 2016). Caurejas sastopamība pacientiem, kuri tika ārstēti ar 5-FU, bija līdz pat 50–80%, kas nopietni ietekmēja ķīmijterapijas progresu un efektivitāti (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Līdz ar to ir ļoti svarīgi atrast efektīvu terapiju 5-FU izraisītas CID ārstēšanai.

Pašlaik CID klīniskajā ārstēšanā ir ieviestas gan nemedikamentozas, gan medikamentozas intervences. Nemedikamentozās intervences ietver saprātīgu diētu un sāls, cukura un citu uzturvielu papildināšanu. CID caurejas novēršanas terapijā bieži izmanto tādus medikamentus kā loperamīds un oktreotīds (Benson et al., 2004). Turklāt dažādās valstīs CID ārstēšanai ar savu unikālo terapiju tiek izmantotas arī etnomedicīnas metodes. Tradicionālā ķīniešu medicīna (TCM) ir viena no tipiskajām etnomedicīnas metodēm, kas Austrumāzijas valstīs, tostarp Ķīnā, Japānā un Korejā, tiek praktizēta jau vairāk nekā 2000 gadus (Qi et al., 2010). TCM uzskata, ka ķīmijterapijas zāles izraisa Qi patēriņu, liesas deficītu, kuņģa disharmoniju un endofītisku mitrumu, kā rezultātā rodas zarnu vadītspējas disfunkcija. Saskaņā ar TCM teoriju CID ārstēšanas stratēģijai galvenokārt jābalstās uz Qi papildināšanu un liesas stiprināšanu (Wang et al., 1994).

Žāvētas saknesAtractylodes macrocephalKoidz. (AM) unPanax žeņšeņsCA Mey. (PG) ir tipiski augu izcelsmes medikamenti TCM ar tādu pašu iedarbību, papildinot ci un stiprinot liesu (Li et al., 2014). AM un PG parasti tiek lietoti kā augu pāris (vienkāršākā ķīniešu augu saderības forma), papildinot ci un stiprinot liesu, lai ārstētu caureju. Piemēram, AM un PG ir dokumentēti klasiskās pretcaurejas formulās, piemēram, Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang no...Taiping Huimin Heji Ju Fang(Dziesmu dinastija, Ķīna) un Bu Zhong Yi Qi Tang noPi Vei Luns(Juaņu dinastija, Ķīna) (1. att.). Vairākos iepriekšējos pētījumos tika ziņots, ka visām trim formulām piemīt spēja mazināt CID (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Turklāt mūsu iepriekšējais pētījums parādīja, ka Shenzhu kapsulām, kas satur tikai AM un PG, ir potenciāla ietekme uz caurejas, kolīta (miegainības sindroma) un citu kuņģa-zarnu trakta slimību ārstēšanu (Feng et al., 2018). Tomēr nevienā pētījumā nav apspriesta AM un PG ietekme un mehānisms CID ārstēšanā, gan kombinācijā, gan atsevišķi.

Tagad zarnu mikrobiota tiek uzskatīta par potenciālu faktoru TCM terapeitiskā mehānisma izpratnē (Feng et al., 2019). Mūsdienu pētījumi liecina, ka zarnu mikrobiotai ir izšķiroša loma zarnu homeostāzes uzturēšanā. Veselīga zarnu mikrobiota veicina zarnu gļotādas aizsardzību, metabolismu, imūno homeostāzi un reakciju, kā arī patogēnu nomākšanu (Thursby un Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Traucēta zarnu mikrobiota tieši vai netieši pasliktina cilvēka ķermeņa fizioloģiskās un imūnās funkcijas, izraisot blakusparādības, piemēram, caureju (Patel et al., 2016; Zhao un Shen, 2010). Pētījumi ir parādījuši, ka 5-FU ievērojami mainīja zarnu mikrobiotas struktūru caurejas pelēm (Li et al., 2017). Tādēļ AM un PM ietekmi uz 5-FU izraisītu caureju var mediēt zarnu mikrobiota. Tomēr joprojām nav zināms, vai AM un PG atsevišķi un kombinācijā varētu novērst 5-FU izraisītu caureju, modulējot zarnu mikrobiotu.

Lai izpētītu AM un PG caurejas mazinošo iedarbību un pamatā esošo mehānismu, mēs izmantojām 5-FU, lai simulētu caurejas modeli pelēm. Šeit mēs koncentrējāmies uz vienas un kombinētas lietošanas (AP) iespējamo ietekmi.Atractylodes macrocephalēteriskā eļļa (AMO) unPanax žeņšeņskopējo saponīnu (PGS), aktīvo komponentu, kas attiecīgi ekstrahēti no AM un PG, ietekme uz caureju, zarnu patoloģiju un mikrobu struktūru pēc 5-FU ķīmijterapijas.

detaļa
100% tīra dabīga Eucommiae Foliuml ēteriskā eļļa ādas kopšanai

Eucommia ulmoides(EU) (ķīniešu valodā parasti saukts par “Du Zhong”) pieder pie eikomu dzimtas (Eucommiaceae), kas ir mazu koku ģints, kuras dzimtene ir Centrālā Ķīna.1]. Šis augs tiek plaši kultivēts Ķīnā tā medicīniskās nozīmes dēļ. No EU ir izolēti aptuveni 112 savienojumi, tostarp lignāni, iridoīdi, fenoli, steroīdi un citi savienojumi. Šī auga papildinošās zāļu formulas (piemēram, gardā tēja) ir uzrādījušas dažas ārstnieciskas īpašības. EU lapām ir augstāka aktivitāte, kas saistīta ar garozu, ziediem un augļiem [2,3Ir ziņots, ka EU lapas stiprina kaulus un ķermeņa muskuļus [4], tādējādi nodrošinot ilgmūžību un veicinot cilvēku auglību [5Ir ziņots, ka garda tējas formula, kas pagatavota no ES lapām, samazina taukainību un uzlabo enerģijas metabolismu. Ir ziņots, ka flavonoīdu savienojumi (piemēram, rutīns, hlorogēnskābe, ferulskābe un kofeīnskābe) ES lapās uzrāda antioksidanta aktivitāti [6].

Lai gan ir pietiekami daudz literatūras par EU fitoķīmiskajām īpašībām, tomēr ir maz pētījumu par dažādu savienojumu, kas iegūti no EU mizām, sēklām, stublājiem un lapām, farmakoloģiskajām īpašībām. Šajā pārskata rakstā tiks sniegta detalizēta informācija par dažādiem savienojumiem, kas iegūti no dažādām EU daļām (mizas, sēklām, stublāja un lapas), un šo savienojumu iespējamo pielietojumu veselību veicinošās īpašībās, pamatojoties uz zinātniskiem pierādījumiem, tādējādi nodrošinot uzziņu materiālu EU pielietošanai.

detaļa
Tīra dabīga Houttuynia cordata eļļa Houttuynia Cordata eļļa Lchthammolum eļļa

Lielākajā daļā jaunattīstības valstu 70–95 % iedzīvotāju primārajā veselības aprūpē izmanto tradicionālās medicīnas līdzekļus, un no tiem 85 % cilvēku kā aktīvo vielu izmanto augus vai to ekstraktus.1Jaunu bioloģiski aktīvu savienojumu meklēšana no augiem parasti ir atkarīga no specifiskas etniskās un tautas informācijas, kas iegūta no vietējiem praktiķiem, un joprojām tiek uzskatīta par svarīgu zāļu atklāšanas avotu. Indijā aptuveni 2000 zāļu ir augu izcelsmes.2Ņemot vērā plašo interesi par ārstniecības augu lietošanu, šajā pārskatā parHouttuynia cordataThunb. sniedz aktuālu informāciju, atsaucoties uz botāniskiem, komerciāliem, etnofarmakoloģiskiem, fitoķīmiskiem un farmakoloģiskiem pētījumiem, kas atrodami literatūrā.H. cordataThunb. pieder pie ģimenesSaururaceaeun to plaši pazīst kā Ķīnas ķirzakas asti. Tas ir daudzgadīgs augs ar stolonifēru sakneņiem, kam ir divi atšķirīgi ķīmotipi.3,4Sugas ķīniešu ķīmijtips ir sastopams savvaļas un daļēji savvaļas apstākļos Indijas ziemeļaustrumos no aprīļa līdz septembrim.5,6,7]H. cordatair pieejams Indijā, īpaši Asamas štata Brahmaputras ielejā, un dažādas Asamas ciltis to tradicionāli izmanto gan dārzeņu veidā, gan dažādiem medicīniskiem nolūkiem.

detaļa
100% tīras Arctium lappa eļļas ražotājs – dabīgā laima Arctium lappa eļļa ar kvalitātes nodrošināšanas sertifikātiem

Ieguvumi veselībai

Diždadža sakni bieži ēd, tomēr to var arī žāvēt un iemērkt tējā. Tā ir labs inulīna avots, kas irprebiotikašķiedrvielas, kas veicina gremošanu un uzlabo zarnu veselību. Turklāt šī sakne satur flavonoīdus (augu barības vielas),fitoķīmiskās vielasun antioksidanti, kas, kā zināms, sniedz veselībai labvēlīgu ietekmi.

Turklāt diždadža sakne var sniegt arī citas priekšrocības, piemēram:

Samazināt hronisku iekaisumu

Diždadža sakne satur vairākus antioksidantus, piemēram, kvercetīnu, fenola skābes un luteolīnu, kas var palīdzēt aizsargāt jūsu šūnas nobrīvie radikāļiŠie antioksidanti palīdz mazināt iekaisumu visā organismā.

Veselības riski

Diždadža sakne tiek uzskatīta par drošu lietošanai pārtikā vai dzeršanai kā tēja. Tomēr šis augs ir ļoti līdzīgs belladonna naktenēm, kas ir toksiskas. Diždadža sakni ieteicams iegādāties tikai no uzticamiem pārdevējiem un atturēties no tās vākšanas pašiem. Turklāt ir minimāla informācija par tās ietekmi uz bērniem vai grūtniecēm. Pirms diždadža saknes lietošanas bērniem vai grūtniecības laikā konsultējieties ar ārstu.

Šeit ir daži citi iespējamie veselības riski, kas jāņem vērā, lietojot diždadža sakni:

Paaugstināta dehidratācija

Diždadža sakne darbojas kā dabisks diurētiķis, kas var izraisīt dehidratāciju. Ja lietojat urīndzenošās tabletes vai citus diurētiskos līdzekļus, diždadža sakni nedrīkst lietot. Ja lietojat šīs zāles, ir svarīgi zināt par citām zālēm, augiem un sastāvdaļām, kas var izraisīt dehidratāciju.

Alerģiska reakcija

Ja Jums ir paaugstināta jutība vai Jums ir bijušas alerģiskas reakcijas pret margrietiņām, ambroziju vai krizantēmām, Jums ir paaugstināts alerģiskas reakcijas risks pret diždadža sakni.

detaļa
Vairumtirdzniecības cena vairumtirdzniecībā 100% tīra AsariRadix Et Rhizoma eļļa Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus

Pētījumos ar dzīvniekiem un in vitro ir pētīta sasafras un tās sastāvdaļu iespējamā pretsēnīšu, pretiekaisuma un sirds un asinsvadu iedarbība. Tomēr trūkst klīnisko pētījumu, un sasafra netiek uzskatīta par drošu lietošanai. Safrolu, kas ir galvenā sasafras saknes mizas un eļļas sastāvdaļa, ir aizliegusi ASV Pārtikas un zāļu pārvalde (FDA), tostarp lietošanai kā aromatizētāju vai smaržvielu, un to nedrīkst lietot ne iekšķīgi, ne ārēji, jo tas ir potenciāli kancerogēns. Safrolu izmanto nelegālā 3,4-metilēndioksimetamfetamīna (MDMA), kas pazīstams arī ar ielu nosaukumiem “ecstasy” vai “Molly”, ražošanā, un safrola un sasafras eļļas pārdošanu uzrauga ASV Narkotiku apkarošanas pārvalde.

detaļa
Vairumtirdzniecības cena vairumā 100% tīra Stellariae Radix ēteriskā eļļa (jauna) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus

Ķīnas farmakopeja (2020. gada izdevums) nosaka, ka YCH metanola ekstraktam jābūt ne mazākam par 20,0% [2], bez norādītiem citiem kvalitātes novērtēšanas rādītājiem. Šī pētījuma rezultāti liecina, ka gan savvaļas, gan kultivēto paraugu metanola ekstraktu saturs atbilda farmakopejas standartam, un starp tiem nebija būtiskas atšķirības. Tādēļ saskaņā ar šo indeksu nebija acīmredzamas kvalitātes atšķirības starp savvaļas un kultivētiem paraugiem. Tomēr kopējo sterīnu un kopējo flavonoīdu saturs savvaļas paraugos bija ievērojami augstāks nekā kultivētajos paraugos. Turpmākā metabolomiskā analīze atklāja lielu metabolītu daudzveidību starp savvaļas un kultivētajiem paraugiem. Turklāt tika izsijāti 97 būtiski atšķirīgi metabolīti, kas ir uzskaitīti tabulā.Papildu tabula S2Starp šiem būtiski atšķirīgajiem metabolītiem ir β-sitosterīns (ID ir M397T42) un kvercetīna atvasinājumi (M447T204_2), par kuriem ziņots, ka tie ir aktīvās sastāvdaļas. Starp diferenciālajiem metabolītiem tika iekļautas arī iepriekš neziņotas sastāvdaļas, piemēram, trigonellīns (M138T291_2), betaīns (M118T277_2), fustīns (M269T36), rotenons (M241T189), arktiins (M557T165) un logānskābe (M399T284_2). Šīm sastāvdaļām ir dažādas lomas antioksidācijā, pretiekaisuma iedarbībā, brīvo radikāļu iznīcināšanā, pretvēža iedarbībā un aterosklerozes ārstēšanā, un tāpēc tās varētu veidot iespējamas jaunas aktīvās sastāvdaļas YCH. Aktīvo sastāvdaļu saturs nosaka medicīnisko materiālu efektivitāti un kvalitāti [7Rezumējot, metanola ekstraktam kā vienīgajam YCH kvalitātes novērtēšanas rādītājam ir daži ierobežojumi, un ir jāturpina pētīt specifiskākus kvalitātes marķierus. Starp savvaļas un kultivēto YCH bija ievērojamas atšķirības kopējos sterīnu, kopējos flavonoīdus un daudzu citu diferenciālo metabolītu saturā; tāpēc starp tiem, iespējams, pastāvēja dažas kvalitātes atšķirības. Tajā pašā laikā jaunatklātajām potenciālajām aktīvajām sastāvdaļām YCH varētu būt svarīga atsauces vērtība YCH funkcionālā pamata izpētei un YCH resursu tālākai attīstībai.

Īstu ārstniecības materiālu nozīme konkrētajā izcelsmes reģionā ir atzīta jau sen, lai ražotu izcilas kvalitātes ķīniešu augu izcelsmes zāles.8Augsta kvalitāte ir būtiska īstu medicīnisko materiālu īpašība, un dzīvotne ir svarīgs faktors, kas ietekmē šādu materiālu kvalitāti. Kopš YCH sāka lietot kā zāles, tajā jau sen dominē savvaļas YCH. Pēc YCH veiksmīgas ieviešanas un pieradināšanas Ninsja provincē 20. gs. astoņdesmitajos gados Yinchaihu medicīnisko materiālu avots pakāpeniski mainījās no savvaļas uz kultivētām YCH. Saskaņā ar iepriekšēju YCH avotu izpēti [9] un mūsu pētniecības grupas lauka pētījumos ir konstatētas būtiskas atšķirības kultivēto un savvaļas ārstniecības materiālu izplatības apgabalos. Savvaļas YCH galvenokārt ir izplatīta Šaaņsji provinces Ningxia Hui autonomajā reģionā, kas atrodas blakus Iekšējās Mongolijas sausajai zonai un centrālajai Ningxia. Jo īpaši tuksneša stepe šajos apgabalos ir vispiemērotākā dzīvotne YCH augšanai. Turpretī kultivētā YCH galvenokārt ir izplatīta uz dienvidiem no savvaļas izplatības apgabala, piemēram, Tongxin apgabalā (kultivētā I) un tā apkārtējās teritorijās, kas ir kļuvusi par lielāko audzēšanas un ražošanas bāzi Ķīnā, un Pengyang apgabalā (kultivētā II), kas atrodas dienvidu apgabalā un ir vēl viena kultivētās YCH ražošanas teritorija. Turklāt iepriekš minēto divu kultivēto apgabalu dzīvotnes nav tuksneša stepes. Tāpēc papildus ražošanas veidam pastāv arī būtiskas atšķirības savvaļas un kultivētās YCH dzīvotnē. Dzīvotne ir svarīgs faktors, kas ietekmē augu izcelsmes ārstniecības materiālu kvalitāti. Dažādas dzīvotnes ietekmēs sekundāro metabolītu veidošanos un uzkrāšanos augos, tādējādi ietekmējot zāļu kvalitāti [10,11Tādēļ šajā pētījumā konstatētās būtiskās atšķirības kopējo flavonoīdu un kopējo sterīnu saturā, kā arī 53 metabolītu ekspresijā varētu būt lauka apsaimniekošanas un dzīvotņu atšķirību rezultāts.

Viens no galvenajiem veidiem, kā vide ietekmē ārstniecības materiālu kvalitāti, ir stresa radīšana izejvielām. Mērens vides stress parasti stimulē sekundāro metabolītu uzkrāšanos [12,13Augšanas/diferenciācijas līdzsvara hipotēze apgalvo, ka tad, kad barības vielu ir pietiekamā daudzumā, augi galvenokārt aug, savukārt, ja barības vielu trūkst, augi galvenokārt diferencējas un ražo vairāk sekundāro metabolītu [14Sausuma stress, ko izraisa ūdens trūkums, ir galvenais vides stress, ar ko saskaras augi sausās teritorijās. Šajā pētījumā kultivētās YCH ūdens stāvoklis ir bagātīgāks, un gada nokrišņu daudzums ir ievērojami augstāks nekā savvaļas YCH (ūdens apgāde kultivētajā I bija aptuveni 2 reizes lielāka nekā savvaļas; kultivētajā II bija aptuveni 3,5 reizes lielāka nekā savvaļas). Turklāt savvaļas vidē augsne ir smilšaina augsne, bet lauksaimniecības zemē augsne ir mālaina augsne. Salīdzinot ar mālu, smilšainai augsnei ir slikta ūdens saglabāšanas spēja, un tā, visticamāk, pastiprinās sausuma stresu. Tajā pašā laikā kultivēšanas process bieži vien tika pavadīts ar laistīšanu, tāpēc sausuma stresa pakāpe bija zema. Savvaļas YCH aug skarbos dabiskos, sausos biotopos, un tāpēc tai var būt nopietnāks sausuma stress.

Osmoregulācija ir svarīgs fizioloģisks mehānisms, ar kuru augi tiek galā ar sausuma stresu, un alkaloīdi ir svarīgi osmotiskie regulatori augstākajos augos [1].15Betaīni ir ūdenī šķīstoši alkaloīdu kvaternārie amonija savienojumi, un tie var darboties kā osmoprotektanti. Sausuma stress var samazināt šūnu osmotisko potenciālu, savukārt osmoprotektanti saglabā un uztur bioloģisko makromolekulu struktūru un integritāti, kā arī efektīvi mazina sausuma stresa radītos bojājumus augiem [16Piemēram, sausuma stresa apstākļos cukurbiešu un šķirņu lilijas (Lycium barbarum) betaīna saturs ievērojami palielinājās [17,18Trigonellīns ir šūnu augšanas regulators, un sausuma stresa apstākļos tas var pagarināt augu šūnu cikla ilgumu, kavēt šūnu augšanu un izraisīt šūnu tilpuma sarukšanu. Relatīvais izšķīdušās vielas koncentrācijas pieaugums šūnā ļauj augam sasniegt osmotisko regulāciju un uzlabo spēju pretoties sausuma stresam [19]. JIA X [20] atklāja, ka, palielinoties sausuma stresam, Astragalus membranaceus (tradicionālās ķīniešu medicīnas avots) ražoja vairāk trigonellīna, kas regulē osmotisko potenciālu un uzlabo spēju pretoties sausuma stresam. Ir arī pierādīts, ka flavonoīdiem ir svarīga loma augu izturībā pret sausuma stresu [21,22Liels skaits pētījumu ir apstiprinājuši, ka mērens sausuma stress veicināja flavonoīdu uzkrāšanos. Lang Duo-Yong et al. [23] salīdzināja sausuma stresa ietekmi uz YCH, kontrolējot ūdens noturēšanas spēju laukā. Tika konstatēts, ka sausuma stress zināmā mērā kavē sakņu augšanu, bet mērena un spēcīga sausuma stresa gadījumā (40% lauka ūdens noturēšanas spēja) kopējais flavonoīdu saturs YCH palielinājās. Tikmēr sausuma stresa apstākļos fitosterīni var regulēt šūnu membrānas plūstamību un caurlaidību, kavēt ūdens zudumu un uzlabot izturību pret stresu [24,25Tādēļ kopējā flavonoīdu, kopējā sterīnu, betaīna, trigonellīna un citu sekundāro metabolītu uzkrāšanās savvaļas YCH varētu būt saistīta ar augstas intensitātes sausuma stresu.

Šajā pētījumā tika veikta KEGG ceļa bagātināšanas analīze ar metabolītiem, kas ievērojami atšķīrās starp savvaļas un kultivēto YCH. Bagātinātie metabolīti ietvēra tos, kas iesaistīti askorbāta un aldarāta metabolisma, aminoacil-tRNS biosintēzes, histidīna metabolisma un beta-alanīna metabolisma ceļos. Šie metabolisma ceļi ir cieši saistīti ar augu stresa rezistences mehānismiem. Starp tiem askorbāta metabolismam ir svarīga loma augu antioksidantu ražošanā, oglekļa un slāpekļa metabolismā, stresa rezistencē un citās fizioloģiskās funkcijās [26]; aminoacil-tRNS biosintēze ir svarīgs olbaltumvielu veidošanās ceļš [27,28], kas ir iesaistīts stresa rezistentu olbaltumvielu sintēzē. Gan histidīna, gan β-alanīna signālceļi var uzlabot augu toleranci pret vides stresu [29,30Tas vēl vairāk norāda, ka metabolītu atšķirības starp savvaļas un kultivēto YCH bija cieši saistītas ar stresa rezistences procesiem.

Augsne ir ārstniecības augu augšanas un attīstības materiālais pamats. Slāpeklis (N), fosfors (P) un kālijs (K) augsnē ir svarīgi barības elementi augu augšanai un attīstībai. Augsnes organiskās vielas satur arī N, P, K, Zn, Ca, Mg un citus makroelementus un mikroelementus, kas nepieciešami ārstniecības augiem. Pārmērīgs vai nepietiekams barības vielu daudzums, vai nesabalansētas barības vielu attiecības ietekmēs augšanu un attīstību, kā arī ārstniecības materiālu kvalitāti, un dažādiem augiem ir atšķirīgas barības vielu prasības [31,32,33Piemēram, zems N stress veicināja alkaloīdu sintēzi Isatis indigotica un bija labvēlīgs flavonoīdu uzkrāšanai tādos augos kā Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge un Dichondra repens Forst. Turpretī pārāk daudz N kavēja flavonoīdu uzkrāšanos tādās sugās kā Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis un Ginkgo biloba, un ietekmēja medicīnisko materiālu kvalitāti [34Fosfora mēslojuma lietošana efektīvi palielināja glicirizīnskābes un dihidroacetona saturu Urālu lakricā [35Kad lietošanas daudzums pārsniedza 0,12 kg·m−2, kopējais flavonoīdu saturs Tussilago farfara samazinājās [36Fosfora mēslojuma lietošana negatīvi ietekmēja polisaharīdu saturu tradicionālās ķīniešu medicīnas augos rhizoma polygonati [37], bet K mēslojums efektīvi palielināja tā saponīnu saturu [38Divgadīga žeņšeņa Panax notoginseng augšanai un saponīnu uzkrāšanai vislabāk veicināja 450 kg·hm−2 K mēslojuma lietošana.39]. Pie attiecības N:P:K = 2:2:1 kopējais hidrotermālā ekstrakta, harpagīda un harpagozīda daudzums bija visaugstākais [40Augstā N, P un K attiecība bija labvēlīga Pogostemon cablin augšanas veicināšanai un gaistošās eļļas satura palielināšanai. Zemā N, P un K attiecība palielināja Pogostemon cablin stublāju lapu eļļas galveno efektīvo komponentu saturu [41YCH ir augs, kas tolerē neauglīgu augsni, un tam var būt īpašas prasības pēc barības vielām, piemēram, N, P un K. Šajā pētījumā, salīdzinot ar kultivēto YCH, savvaļas YCH augu augsne bija relatīvi neauglīga: organisko vielu, kopējā N, kopējā P un kopējā K saturs augsnē bija attiecīgi aptuveni 1/10, 1/2, 1/3 un 1/3 no kultivēto augu satura. Tāpēc augsnes barības vielu atšķirības varētu būt vēl viens iemesls atšķirībām starp metabolītiem, kas konstatēti kultivētajā un savvaļas YCH. Weibao Ma et al. [42] atklāja, ka noteikta daudzuma N mēslojuma un P mēslojuma lietošana ievērojami uzlaboja sēklu ražu un kvalitāti. Tomēr barības vielu ietekme uz YCH kvalitāti nav skaidra, un mēslošanas pasākumi ārstniecības materiālu kvalitātes uzlabošanai ir jāpēta sīkāk.

Ķīniešu augu izcelsmes zālēm piemīt īpašības: "Labvēlīgi biotopi veicina ražu, bet nelabvēlīgi biotopi uzlabo kvalitāti".43Pakāpeniski pārejot no savvaļas uz kultivētu YCH, augu dzīvotne mainījās no sausām un neauglīgām tuksneša stepēm uz auglīgu lauksaimniecības zemi ar bagātīgāku ūdens pieejamību. Kultivētās YCH dzīvotne ir labāka, un raža ir augstāka, kas palīdz apmierināt tirgus pieprasījumu. Tomēr šī labākā dzīvotne izraisīja būtiskas izmaiņas YCH metabolītos; vai tas veicina YCH kvalitātes uzlabošanos un kā panākt augstas kvalitātes YCH ražošanu, izmantojot zinātniski pamatotus audzēšanas pasākumus, būs nepieciešami turpmāki pētījumi.

Simulatīvā dzīvotņu kultivēšana ir savvaļas ārstniecības augu dzīvotņu un vides apstākļu simulācijas metode, kuras pamatā ir zināšanas par augu ilgtermiņa adaptāciju specifiskiem vides stresa faktoriem.43Simulējot dažādus vides faktorus, kas ietekmē savvaļas augus, īpaši to augu sākotnējo dzīvotni, kurus izmanto kā autentisku ārstniecības materiālu avotus, šī pieeja izmanto zinātnisko dizainu un inovatīvu cilvēka iejaukšanos, lai līdzsvarotu ķīniešu ārstniecības augu augšanu un sekundāro metabolismu.43]. Šīs metodes mērķis ir panākt optimālus pasākumus augstas kvalitātes medicīnisko materiālu izstrādei. Simulatīvai dzīvotņu kultivēšanai vajadzētu nodrošināt efektīvu veidu augstas kvalitātes YCH ražošanai pat tad, ja farmakodinamiskais pamats, kvalitātes marķieri un reakcijas mehānismi uz vides faktoriem nav skaidri. Attiecīgi mēs iesakām, ka zinātniskā dizaina un lauka apsaimniekošanas pasākumi YCH audzēšanā un ražošanā jāveic, ņemot vērā savvaļas YCH vides īpašības, piemēram, sausu, neauglīgu un smilšainu augsni. Vienlaikus tiek cerēts, ka pētnieki veiks padziļinātākus pētījumus par YCH funkcionālo materiālu bāzi un kvalitātes marķieriem. Šie pētījumi var nodrošināt efektīvākus YCH novērtēšanas kritērijus un veicināt augstas kvalitātes ražošanu un nozares ilgtspējīgu attīstību.

detaļa
Zāļu Fructus Amomi eļļa Dabīgas masāžas difuzori 1kg iesaiņojumā Amomum villosum ēteriskā eļļa

Zingiberaceae dzimta (Zingiberaceae) ir piesaistījusi arvien lielāku uzmanību alelopātiskajos pētījumos, pateicoties bagātīgajām gaistošajām eļļām un tās pārstāvju sugu aromātiskumam. Iepriekšējie pētījumi bija parādījuši, ka Curcuma zedoaria (zedoary) ķīmiskās vielas [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt un RMSm. [41] un Zingiber officinale Rosc. [42] ingveru dzimtas augiem piemīt alelopātiska ietekme uz sēklu dīgšanu un dīgstu augšanu kukurūzā, salātos un tomātos. Mūsu pašreizējais pētījums ir pirmais ziņojums par A. villosum (Zingiberaceae dzimtas pārstāvis) stublāju, lapu un jauno augļu gaistošo vielu alelopātisko aktivitāti. Stublāju, lapu un jauno augļu eļļas raža bija attiecīgi 0,15%, 0,40% un 0,50%, kas norāda, ka augļi ražoja lielāku gaistošo eļļu daudzumu nekā stublāji un lapas. Galvenās no stublājiem iegūto gaistošo eļļu sastāvdaļas bija β-pinēns, β-fellandrēns un α-pinēns, kas bija līdzīgs galveno lapu eļļas ķīmisko vielu β-pinēna un α-pinēna (monoterpēnu ogļūdeņražu) modelim. No otras puses, jauno augļu eļļa bija bagāta ar bornilacetātu un kamparu (skābekļa piesātinātiem monoterpēniem). Rezultātus apstiprināja Do N Dai atklājumi [30,32] un Hui Ao [31], kas bija identificējuši eļļas no dažādiem A. villosum orgāniem.

Ir bijuši vairāki ziņojumi par šo galveno savienojumu augu augšanu kavējošo aktivitāti citās sugās. Šalinders Kaurs atklāja, ka eikalipta α-pinēns ievērojami nomāc Amaranthus viridis L. sakņu garumu un dzinumu augstumu 1,0 μL koncentrācijā [43], un citā pētījumā tika pierādīts, ka α-pinēns kavē agrīnu sakņu augšanu un izraisa oksidatīvus bojājumus sakņu audos, palielinot reaktīvo skābekļa sugu veidošanos [44Dažos ziņojumos ir apgalvots, ka β-pinēns kavē testa nezāļu dīgšanu un stādu augšanu no devas atkarīgā veidā, izjaucot membrānas integritāti [45], mainot augu bioķīmiju un pastiprinot peroksidāžu un polifenolu oksidāžu aktivitāti [46β-fellandrēns uzrādīja maksimālu Vigna unguiculata (L.) Walp dīgšanas un augšanas inhibīciju 600 ppm koncentrācijā [47], savukārt kampars 250 mg/m3 koncentrācijā nomāca Lepidium sativum L. saknītes un dzinumu augšanu. [48Tomēr pētījumu, kas ziņo par bornilacetāta alelopātisko iedarbību, ir maz. Mūsu pētījumā β-pinēna, bornilacetāta un kampara alelopātiskā iedarbība uz sakņu garumu bija vājāka nekā gaistošajām eļļām, izņemot α-pinēnu, savukārt lapu eļļa, kas bagāta ar α-pinēnu, bija arī fitotoksiskāka nekā atbilstošās gaistošās eļļas no A. villosum stublājiem un augļiem, un abi šie atklājumi liecina, ka α-pinēns varētu būt svarīga ķīmiskā viela šīs sugas alelopātijā. Vienlaikus rezultāti arī liecināja, ka daži augļu eļļā esošie savienojumi, kuru nebija daudz, varētu veicināt fitotoksiskās iedarbības rašanos, un šis atklājums nākotnē ir jāturpina pētīt.

Normālos apstākļos alleloķīmisko vielu allelopātiskā iedarbība ir sugai specifiska. Dzjans un līdzautori atklāja, ka Artemisia sieversia ražotā ēteriskā eļļa spēcīgāk iedarbojas uz Amaranthus retroflexus L. nekā uz Medicago sativa L., Poa annua L. un Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng. [49Citā pētījumā Lavandula angustifolia Mill. gaistošā eļļa izraisīja dažādas pakāpes fitotoksisku iedarbību uz dažādām augu sugām. Lolium multiflorum Lam. bija visjutīgākā akceptorsuga, kuras hipokotila un radikulu augšana tika kavēta attiecīgi par 87,8% un 76,7% pie 1 μL/ml eļļas devas, bet gurķu stādu hipokotila augšana tik tikko tika ietekmēta [20Mūsu rezultāti arī parādīja, ka pastāv atšķirība jutībā pret A. villosum gaistošajām vielām starp L. sativa un L. perenne.

Vienas sugas gaistošie savienojumi un ēteriskās eļļas var kvantitatīvi un/vai kvalitatīvi atšķirties augšanas apstākļu, augu daļu un noteikšanas metožu dēļ. Piemēram, kādā ziņojumā tika pierādīts, ka piranoīds (10,3%) un β-kariofilēns (6,6%) bija galvenie gaistošo vielu savienojumi, ko izdala Sambucus nigra lapas, savukārt benzaldehīds (17,8%), α-bulnesēns (16,6%) un tetrakozāns (11,5%) bija bagātīgi atrodami no lapām ekstrahētajās eļļās [50Mūsu pētījumā svaigu augu materiālu izdalītajiem gaistošajiem savienojumiem bija spēcīgāka alelopātiska iedarbība uz testa augiem nekā ekstrahētajām gaistošajām eļļām, un atšķirības reakcijā bija cieši saistītas ar abu preparātu aleloķīmisko vielu atšķirībām. Precīzas atšķirības starp gaistošajiem savienojumiem un eļļām ir jāturpina pētīt turpmākajos eksperimentos.

Augsnes paraugos, kuriem bija pievienotas gaistošās eļļas, mikrobu daudzveidības un mikrobu kopienas struktūras atšķirības bija saistītas ar konkurenci starp mikroorganismiem, kā arī ar jebkādu toksisku iedarbību un gaistošo eļļu ilgumu augsnē. Vokou un Liotiri [51] konstatēja, ka četru ēterisko eļļu (0,1 ml) attiecīga lietošana kultivētā augsnē (150 g) aktivizēja augsnes paraugu elpošanu, pat eļļas atšķīrās pēc to ķīmiskā sastāva, kas liecina, ka augu eļļas izmanto kā oglekļa un enerģijas avotu augsnes mikroorganismi. Pašreizējā pētījumā iegūtie dati apstiprināja, ka eļļas no visa A. villosum auga veicināja acīmredzamu augsnes sēnīšu sugu skaita pieaugumu līdz 14. dienai pēc eļļas pievienošanas, norādot, ka eļļa var nodrošināt oglekļa avotu vairāk augsnes sēnītēm. Citā pētījumā tika ziņots par atklājumu: augsnes mikroorganismi atguva savu sākotnējo funkciju un biomasu pēc īslaicīgas variācijas perioda, ko izraisīja Thymbra capitata L. (Cav) eļļas pievienošana, bet eļļa lielākajā devā (0,93 µL eļļas uz gramu augsnes) neļāva augsnes mikroorganismiem atgūt sākotnējo funkcionalitāti [52Pašreizējā pētījumā, pamatojoties uz augsnes mikrobioloģisko analīzi pēc apstrādes ar dažādām dienām un koncentrācijām, mēs pieņēmām, ka augsnes baktēriju kopiena atjaunosies pēc vairākām dienām. Turpretī sēnīšu mikrobiota nevar atgriezties sākotnējā stāvoklī. Turpmāk minētie rezultāti apstiprina šo hipotēzi: galveno koordinātu analīze (PCoA) atklāja eļļas augstās koncentrācijas atšķirīgo ietekmi uz augsnes sēnīšu mikrobioma sastāvu, un siltuma karšu attēlojumi vēlreiz apstiprināja, ka augsnes, kas apstrādāta ar 3,0 mg/ml eļļas (proti, 0,375 mg eļļas uz gramu augsnes), sēnīšu kopienas sastāvs ģints līmenī ievērojami atšķīrās no citām apstrādēm. Pašlaik pētījumi par monoterpēnu ogļūdeņražu vai skābekli saturošu monoterpēnu pievienošanas ietekmi uz augsnes mikrobu daudzveidību un kopienas struktūru joprojām ir nepietiekami. Dažos pētījumos ziņots, ka α-pinēns palielināja augsnes mikrobu aktivitāti un Methylophilaceae (metilotrofu grupa, proteobaktēriju) relatīvo pārpilnību zemā mitruma saturumā, spēlējot svarīgu lomu kā oglekļa avots sausākās augsnēs [53Līdzīgi, A. villosum visa auga gaistošā eļļa, kas satur 15,03% α-pinēna (Papildu tabula S1), acīmredzami palielināja proteobaktēriju relatīvo daudzumu pie 1,5 mg/ml un 3,0 mg/ml, kas liecināja, ka α-pinēns, iespējams, darbojas kā viens no oglekļa avotiem augsnes mikroorganismiem.

Dažādu A. villosum orgānu radītajiem gaistošajiem savienojumiem bija dažādas pakāpes alelopātiska ietekme uz L. sativa un L. perenne, kas bija cieši saistīta ar ķīmiskajiem komponentiem, ko saturēja A. villosum augu daļas. Lai gan gaistošās eļļas ķīmiskais sastāvs tika apstiprināts, A. villosum istabas temperatūrā izdalītie gaistošie savienojumi nav zināmi, un tiem nepieciešami turpmāki pētījumi. Turklāt jāņem vērā arī sinerģiskā iedarbība starp dažādām aleloķīmiskām vielām. Attiecībā uz augsnes mikroorganismiem, lai vispusīgi izpētītu gaistošās eļļas ietekmi uz augsnes mikroorganismiem, mums joprojām ir jāveic padziļinātāki pētījumi: jāpagarina gaistošās eļļas apstrādes laiks un jānoskaidro gaistošās eļļas ķīmiskā sastāva atšķirības augsnē dažādās dienās.

detaļa
Tīra Artemisia capillaris eļļa sveču un ziepju pagatavošanai vairumtirdzniecības difuzora ēteriskā eļļa, jauna niedru degļu difuzoriem

Grauzēju modeļa dizains

Dzīvnieki tika nejauši sadalīti piecās grupās pa piecpadsmit pelēm katrā. Kontroles grupas un modeļa grupas pelēm tika veikta mākslīgā barošana arsezama eļļa6 dienas. Pozitīvās kontroles grupas pelēm 6 dienas tika ievadītas bifendāta tabletes (BT, 10 mg/kg). Eksperimentālās grupas 6 dienas tika apstrādātas ar 100 mg/kg un 50 mg/kg AEO, kas izšķīdināts sezama eļļā. 6. dienā kontroles grupa tika apstrādāta ar sezama eļļu, un visas pārējās grupas tika apstrādātas ar vienu 0,2% CCl4 devu sezama eļļā (10 ml/kg), ko veicisintraperitoneāla injekcijaPēc tam pelēm tika liegta badošanās, un no retrobulbārajiem asinsvadiem tika savākti asins paraugi; savāktās asinis tika centrifugētas ar ātrumu 3000 ×g10 minūtes, lai atdalītu serumu.Dzemdes kakla dislokācijatika veikta tūlīt pēc asins ņemšanas, un aknu paraugi tika nekavējoties noņemti. Viena aknu parauga daļa nekavējoties tika uzglabāta −20 °C temperatūrā līdz analīzei, bet otra daļa tika izgriezta un fiksēta 10%formalīnsšķīdums; atlikušie audi tika uzglabāti −80 °C temperatūrā histopatoloģiskai analīzei (Vangs un līdzautori, 2008,Hsu et al., 2009,Nie et al., 2015).

Bioķīmisko parametru mērīšana serumā

Aknu bojājums tika novērtēts, aprēķinotfermentatīvās aktivitātesseruma ALAT un ASAT noteikšanai, izmantojot atbilstošos komerciālos komplektus saskaņā ar komplektu instrukcijām (Nandzjina, Dzjansu province, Ķīna). Enzīmu aktivitātes tika izteiktas vienībās uz litru (U/l).

MDA, SOD, GSH un GSH-P mērīšanaxaknu homogenātos

Aknu audi tika homogenizēti ar aukstu fizioloģisko šķīdumu attiecībā 1:9 (svars/tilpums, aknas:fizioloģiskais šķīdums). Homogenāti tika centrifugēti (2500 ×g10 minūtes), lai savāktu supernatantu turpmākajām noteikšanām. Aknu bojājums tika novērtēts saskaņā ar aknu MDA un GSH līmeņa, kā arī SOD un GSH-P līmeņa mērījumiem.xaktivitātes. Visas šīs aktivitātes tika noteiktas, ievērojot komplektā sniegtos norādījumus (Nanjin, Dzjansu province, Ķīna). MDA un GSH rezultāti tika izteikti kā nmol uz mg olbaltumvielu (nmol/mg proteīna), un SOD un GSH-P aktivitātesxtika izteikti kā U uz mg olbaltumvielu (U/mg proteīna).

Histopatoloģiskā analīze

Svaigi iegūtas aknu daļas tika fiksētas 10% buferētā šķīdumā.paraformaldehīdsfosfāta šķīdumā. Pēc tam paraugs tika iestrādāts parafīnā, sagriezts 3–5 μm gabaliņos, iekrāsots arhematoksilīnsuneozīns(H&E) saskaņā ar standarta procedūru un visbeidzot analizē argaismas mikroskopija(Tian et al., 2012).

Statistiskā analīze

Rezultāti tika izteikti kā vidējais rādītājs ± standartnovirze (SN). Rezultāti tika analizēti, izmantojot statistikas programmu SPSS Statistics, 19.0 versija. Dati tika pakļauti dispersijas analīzei (ANOVA,p< 0,05), kam sekoja Daneta tests un Daneta T3 tests, lai noteiktu statistiski nozīmīgas atšķirības starp dažādu eksperimentālo grupu vērtībām. Nozīmīga atšķirība tika uzskatīta līmenīp< 0,05.

Rezultāti un diskusija

AEO dalībnieki

Veicot GC/MS analīzi, tika konstatēts, ka AEO satur 25 sastāvdaļas, kas eluējas no 10 līdz 35 minūtēm, un tika identificētas 21 sastāvdaļas, kas veido 84% no ēteriskās eļļas (1. tabula). Gaistošā eļļa saturējamonoterpenoīdi(80,9%), seskviterpenoīdi (9,5%), piesātinātie nesazarotie ogļūdeņraži (4,86%) un dažādi acetilēni (4,86%). Salīdzinot ar citiem pētījumiem (Guo et al., 2004), mēs AEO atradām lielu daudzumu monoterpenoīdu (80,90%). Rezultāti parādīja, ka visizplatītākā AEO sastāvdaļa ir β-citronellols (16,23%). Citas galvenās AEO sastāvdaļas ir 1,8-cineols (13,9%),kampars(12,59%),linalols(11,33%), α-pinēns (7,21%), β-pinēns (3,99%),timols(3,22 %) unmircēns(2,02 %). Ķīmiskā sastāva variācijas var būt saistītas ar vides apstākļiem, kuriem augs bija pakļauts, piemēram, minerālūdeni, saules gaismu, attīstības stadiju unuzturs.

detaļa
Tīra Saposhnikovia divaricata eļļa sveču un ziepju pagatavošanai vairumtirdzniecības difuzora ēteriskā eļļa, jauna niedru degļu difuzoriem

2.1. SDE sagatavošana

SD sakneņi tika iegādāti kā žāvēts augs no Hanherb Co. (Guri, Koreja). Augu materiālu taksonomisko apstiprināja Dr. Go-Ya Choi no Korejas Austrumu medicīnas institūta (KIOM). Sertifikāta paraugs (numurs 2014 SDE-6) tika deponēts Korejas Standarta augu resursu herbārijā. Žāvēti SD sakneņi (320 g) tika divas reizes ekstrahēti ar 70% etanolu (ar 2 stundu atplūdes gāzi), un pēc tam ekstrakts tika koncentrēts pazeminātā spiedienā. Novārījums tika filtrēts, liofilizēts un uzglabāts 4°C temperatūrā. Žāvēta ekstrakta iznākums no neapstrādātiem izejmateriāliem bija 48,13% (m/m).

2.2. Kvantitatīva augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfijas (HPLC) analīze

Hromatogrāfiskā analīze tika veikta ar HPLC sistēmu (Waters Co., Milford, MA, ASV) un fotodiodu matricas detektoru. SDE HPLC analīzei primāraisO-glikozilcimifugīna standarts tika iegādāts no Korejas Tradicionālās medicīnas nozares veicināšanas institūta (Kjonsana, Koreja), unsek-O-glikozilhamaudols un 4′-O-β-D-glikozil-5-O-metilvisamminols tika izolēts mūsu laboratorijā un identificēts ar spektrālās analīzes palīdzību, galvenokārt ar NMR un MS.

SDE paraugi (0,1 mg) tika izšķīdināti 70% etanolā (10 ml). Hromatogrāfiskā atdalīšana tika veikta ar XSelect HSS T3 C18 kolonnu (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, ASV). Mobilā fāze sastāvēja no acetonitrila (A) un 0,1% etiķskābes ūdenī (B) ar plūsmas ātrumu 1,0 ml/min. Tika izmantota šāda daudzpakāpju gradienta programma: 5% A (0 min), 5–20% A (0–10 min), 20% A (10–23 min) un 20–65% A (23–40 min). Detekcijas viļņa garums tika skenēts pie 210–400 nm un reģistrēts pie 254 nm. Injekcijas tilpums bija 10,0μL. Trīs hromonu noteikšanai tika sagatavoti standarta šķīdumi ar galīgo koncentrāciju 7,781 mg/ml (prim-O-glikozilcimifugīns), 31,125 mg/ml (4′-)O-β-D-glikozil-5-O-metilvisaminols) un 31,125 mg/ml (sek-O-glikozilhamaudols) metanolā un uzglabāts 4°C temperatūrā.

2.3. Pretiekaisuma aktivitātes novērtējumsIn vitro

2.3.1. Šūnu kultūra un paraugu apstrāde

RAW 264.7 šūnas tika iegūtas no Amerikas Tipisko Kultūru Kolekcijas (ATCC, Manassas, VA, ASV) un audzētas DMEM vidē, kas saturēja 1% antibiotiku un 5,5% FBS. Šūnas tika inkubētas mitrinātā atmosfērā ar 5% CO2 37°C temperatūrā. Lai stimulētu šūnas, barotne tika aizstāta ar svaigu DMEM vidi un lipopolisaharīdu (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, ASV) 1μg/ml tika pievienots SDE klātbūtnē vai bez tās (200 vai 400μg/ml) vēl 24 stundas.

2.3.2. Slāpekļa oksīda (NO), prostaglandīna E2 (PGE2), audzēja nekrozes faktora noteikšanaα(TNF-α) un interleikīna-6 (IL-6) ražošana

Šūnas tika apstrādātas ar SDE un stimulētas ar LPS 24 stundas. NO ražošana tika analizēta, mērot nitrītu, izmantojot Grīsa reaģentu saskaņā ar iepriekšēju pētījumu [12Iekaisuma citokīnu PGE2, TNF- sekrēcijaα, un IL-6 tika noteikts, izmantojot ELISA komplektu (R&D systems) saskaņā ar ražotāja norādījumiem. SDE ietekme uz NO un citokīnu veidošanos tika noteikta pie 540 nm vai 450 nm, izmantojot Wallac EnVision.™mikroplašu lasītājs (PerkinElmer).

2.4. Antiosteoartrīta aktivitātes novērtējumsIn vivo

2.4.1. Dzīvnieki

Tēviņu Sprague-Dawley žurkas (7 nedēļas vecas) tika iegādātas no Samtako Inc. (Osana, Koreja) un turētas kontrolētos apstākļos ar 12 stundu gaismas/tumsas ciklu°C un% mitruma. Žurkām tika nodrošināta laboratorijas barība un ūdens.neierobežotiVisas eksperimentālās procedūras tika veiktas saskaņā ar Nacionālo veselības institūtu (NIH) vadlīnijām un apstiprinātas Tedžonas universitātes (Tedžona, Korejas Republika) Dzīvnieku aprūpes un izmantošanas komitejā.

2.4.2. OA indukcija ar MIA žurkām

Dzīvnieki tika nejaušināti iedalīti ārstēšanas grupās pirms pētījuma uzsākšanas (katrā grupā). MIA šķīdums (3 mg/50μAnestēzijas laikā, ko izraisīja ketamīna un ksilazīna maisījums, labā ceļa locītavas telpā tieši injicēja 0,9 % l. Žurkas tika nejauši sadalītas četrās grupās: (1) fizioloģiskā šķīduma grupa bez MIA injekcijas, (2) MIA grupa ar MIA injekciju, (3) ar SDE ārstētā grupa (200 mg/kg) ar MIA injekciju un (4) ar indometacīnu (IM) ārstētā grupa (2 mg/kg) ar MIA injekciju. Žurkām SDE un IM tika ievadītas iekšķīgi 1 nedēļu pirms MIA injekcijas 4 nedēļas. Šajā pētījumā izmantotā SDE un IM deva bija balstīta uz iepriekšējos pētījumos izmantotajām devām [10,13,14].

2.4.3. Pakaļķepas svara nestspējas sadalījuma mērījumi

Pēc osteoartrīta (OA) indukcijas tika izjaukts pakaļķepu svara nestspējas sākotnējais līdzsvars. Lai novērtētu svara nestspējas izmaiņas, tika izmantots rīcībnespējas testeris (Linton instrumentation, Norfolk, Apvienotā Karaliste). Žurkas tika uzmanīgi ievietotas mērīšanas kamerā. Pakaļkājas radītais svara nestspējas spēks tika aprēķināts vidēji 3 sekunžu periodā. Svara sadalījuma attiecība tika aprēķināta pēc šāda vienādojuma: [svars uz labās pakaļkājas/(svars uz labās pakaļkājas + svars uz kreisās pakaļkājas)] × 100 [15].

2.4.4. Seruma citokīnu līmeņa mērījumi

Asins paraugi tika centrifugēti ar 1500 g 10 minūtes 4°C temperatūrā; pēc tam serums tika savākts un uzglabāts –70°C temperatūrā līdz lietošanai. IL-1 līmenisβ, IL-6, TNF-αun PGE2 līmenis serumā tika mērīts, izmantojot ELISA komplektus no R&D Systems (Mineapolisa, Minesota, ASV) saskaņā ar ražotāja norādījumiem.

2.4.5. Reāllaika kvantitatīvā RT-PCR analīze

Kopējā RNS tika ekstrahēta no ceļa locītavas audiem, izmantojot TRI reaģentu® (Sigma-Aldrich, Sentluisa, Misūri, ASV), reversā transkripcija kDNS un PCR amplifikācija, izmantojot TM One Step RT PCR komplektu ar SYBR green (Applied Biosystems, Grand Island, Ņujorka, ASV). Reālā laika kvantitatīvā PCR tika veikta, izmantojot Applied Biosystems 7500 reālā laika PCR sistēmu (Applied Biosystems, Grand Island, Ņujorka, ASV). Praimeru secības un zondes secība ir parādītas tabulā.1Parauga kDNS alikvotas un vienāds GAPDH kDNS daudzums tika amplificēti ar TaqMan® Universal PCR galveno maisījumu, kas satur DNS polimerāzi, saskaņā ar ražotāja norādījumiem (Applied Biosystems, Foster, CA, ASV). PCR apstākļi bija 2 minūtes 50°C temperatūrā, 10 minūtes 94°C temperatūrā, 15 sekundes 95°C temperatūrā un 1 minūte 60°C temperatūrā 40 ciklu garumā. Mērķa gēna koncentrācija tika noteikta, izmantojot salīdzinošo Ct (sliekšņa ciklu skaits krustpunktā starp amplifikācijas grafiku un slieksni) metodi saskaņā ar ražotāja norādījumiem.

detaļa